华蟾素注射液体外对小鼠脾淋巴细胞功能影响的研究.pdfVIP

桔床和实验 医学杂志 2014年 12月 第13卷 第23期 ·1921 · DOI：10．3969／j．’issn．1671—4695．2014．23．001 文章编号：1671—4695(2014)23—1921—05 华蟾素注射液体外对小鼠脾淋巴细胞功能影响的研究 张延京 魏晓露 贺晶 边宝林 (1首都医科大学附属北京友谊医院l临床检验中心 北京 100050； 2中国中医科学院中药研究所 北京 100700) 【摘要】 目的 观察华蟾素注射液对小鼠脾淋巴细胞增殖、活化的影响，探讨其对免疫系统调节的作用，为阐明其 免疫作用机制提供药理学依据。方法 无菌分离小鼠脾淋巴细胞，制备淋 巴细胞悬液，按临床给药量设置华蟾素注射 液不同浓度组给药。MTr法分别检测刀豆蛋白A(Conn)刺激和脂多糖 (LPS)刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖；用华蟾素注 射液预孵育淋巴细胞6h，分别加入ConA或LPS诱导淋巴细胞活化，利用流式细胞仪通过Aimplex~对细胞上清液进行 GM—CSF、TNF— ，IFN一 ，IL一1，IL一2，IL一6，IL一10细胞 因子检测，评价其免疫效果。结果 华蟾素注射液7．82 ms／ml、15．63ms／m!和 31．25ms／m1浓度组与ConA协 同刺激淋巴细胞增殖。1．96ms／m!和62．50ms／ml浓度组与LPS 协 同抑制细胞增殖。华蟾素注射液可促进 rNF—oL和 IL一6分泌，一定程度抑制 IFN一 和GM—CSF分泌，与不同刺激 剂作用可不同程度促进或抑制 IL一2、IL一1d和 IL一10的分泌。结论 华蟾素注射液可一定程度促进 B淋巴细胞增 殖，但对体液免疫的作用效果和作用机制还有待进一步研究。 【关键词】 小鼠 体外实验 华蟾素注射液 脾淋巴细胞 流式细胞术 免疫功能 TheresearchofCinobufaciniOHimmunefunctionofmousespleenlymphocyteinvitro．ZHANGYan—ring ，WEIXiao—lu ，HE．1ing ，et a1．1ClinicalLaboratoryCenter，BeijingFriendshipHospital，CapitalMedcialUniversity，Be ng100050，China；2InstituteofChineseMateria Medcia，ChinaAcademyofChineseMedwalSciences，Bejiing100700，China． Correspondingauthor：BIAN Bao—Z ．E—mail：bian50101@sina ．con 【Abstrad】 0bjective Toanalyzetheeffectofeinobufaciniinjection(Cinobufaeini)onmicespleenlymphocyteproliferationnadactiva— tioninvitro．Todiscussitsroleinregulationofimmunesystem，providethepharmacological evidencetoclarifyitsimmunemechna ism．Methods Asepticisolatedthemicespleen lymphocyte，whichpreparedthelymphocytesuspension，accordingtohteclinicaldosage．TheCinobufaeini groupwasadministeredwithdifferentconcentration．MTTmethodwasusedtodetecthteconcanavalinA(ConA)andlipopolysaccharide(LPS) stimulatingmicespleenlymphocyteproliferationseparately．Cinobufaeinipre—incubatehtelymphocytes6h，addConA orLPSsepraatelytoin- ducehtelymphocyteactivation．Th egfloweytomet~withAimplex?kitoncellsupernatantwas usedtodetecttheeytokinesofGM —CSF，TNF— ot，IFN一 ，IL—ld，IL一2，IL一6andI