金褐霉素高产相关基因的筛选与表达.pdfVIP

※生物工程 食 品科学 2014,VoL35,No．09 203 金褐霉素高产相关基因的筛选与表达 魏 杰 ，宋 威 ，石 佳 (辽宁大学生命科学院，辽宁 沈阳 110036) 摘 要：通过高效表达金褐霉素生物合成基因簇中的调控基因来提高其产量。本实验从野生金褐链霉菌SYAU0709 克隆口“棚 因，L~ kpMD19一T并测序。将带有n“ 堪 因的表达质粒pBJAuM转化金褐链霉菌sYAu0709， 高效表达口“棚 因，获得重组菌株。通过高效液相色谱分析检测，重组菌株的金褐霉素产量提高约6倍，并且遗 传性能稳定，发酵结果说明过量表达aurJ3M~因能够提高金褐霉素的产量。 关键词：金褐链霉菌；金褐霉素；au 肘基因；发酵 ScreeningandExpressionofRegulatoryGeneforEnhancedAureofuscinProduction WEIJie，SONG Wei，SHIJia (SchoolofLifeScience，LiaoningUniversity，Shenyang 110036，China) Abstract：Aims：Toourknowledge，theproductionofaureofuscinisverylow inthewild-typestminofStreptomyces aureofuscusf aureofuscus)．Thisstudyattemptedtoincreasetheproductionofaureofuscinbyover—expressionofa regulatorygeneinthewild—typestrain．MethodsandResults：Theaurj3MgenewasamplifiedbyPCRfrom aureofuscus SYAU0709，ligatedintothevectorpMD 19，andsequenced．Recombinantbacterialstrainswereconstructedbytransforming SYAU0709withanexpressionplasmid(pBJAUM)htatcontainedaurj3M,therebyincreasingthenumberofaurj3M gene copies．Conclusions：ThefermentationresultsshowedaurJ3M genecouldpromoteaureofuscinproduction．Specifically， therecombinantstrainproduced approximately600％ moreaureofuscin，asquantifiedbyhigh-performanceliquid chromatographyanalysis．Therecombinantstrainalsohadgoodgeneticstability． Keywords：Streptomycesaureofuscus；aureofuscin；aurj3M gene；femr enattion 中图分类号：Q78 文献标志码：A 文章编号：1002—6630 (2014)09—0203．04 doi：10．7506／spkx1002-6630—201409040 金褐霉素 (Aureofuscin)是从我国土壤中分离得到的 本研究为开发除纳他霉素 以外的以及具有我国自主知识产 链霉菌新种——金褐链霉菌 (Streptomycesaureofuscusn．sp) 权的新型生物防腐剂提供了先机。 所产生的一种四烯大环 内酯类抗真菌抗生素，其化学结构 本课题组是在前期获得 了金褐霉素生物合成基因簇 与国外文献报道的纳他霉素 (Natamycin)结构相似。19