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. . . . 15 . 1 , 2004 CH IN ESE J D IAL A R T IF OR GAN S V o l N o M arch 胰岛移植物的制备和保存 崔　岱, 刘　超 南京医科大学第一附属医院内分泌科, 江苏　南京　210029 　　摘要　目的: 胰岛移植是治疗 型糖尿病较为理想的方法, 而胰岛移植物的合理制备和保存 I 是保证胰岛移植成功的首要条件。目前, 胰岛的分离、纯化有多种方法, 主要包括人工分离法和机 械自动分离法, 分离纯化后的细胞经过鉴定后, 可以直接应用, 或冷藏、冷冻保存, 以确保较高纯度 和活力的胰岛细胞, 由此提高胰岛移植的成功率。 　　关键词: 胰岛　胰岛移植　分离　纯化　鉴定　冻存 　　糖尿病严重危害人类健康, 已成为全球性 要求是将连接外分泌部和胰岛细胞团的结缔组 的卫生保健问题。而要从根本上治疗糖尿病就 织解离, 同时要保持包括基质在内的内分泌部 〔2 〕 必须建立内源性胰岛分泌系统, 这其中包括胰 结构完整 ; 胰岛纯化则是将胰岛与胰腺外分 〔1〕 泌组织分开。目前常用的分离纯化方法有以下 岛移植和胰腺移植等 。胰腺移植作为治疗糖 尿病的根本方法在临床上的应用价值已经确 几种: 立, 但这种移植创伤大、并发症多、费用高、供体 11　常规分离培养法 来源不足, 只适用于伴有严重慢 性并发症的患 　　将胰腺在无菌条件下剪去包膜、脂肪、血管 者。相反, 胰岛移植具有简单、安全、不良反应轻 和周围结缔组织, 以 H ank s 液冲洗, 剪成 1 等优点, 是治愈糖尿病最有希望的方法之一。但 mm 3 碎块, 然后移入R PM I1640 培养液中, 在 胰岛移植也同样面临着供体匮乏、胰岛细胞经 20% 新生牛血清与庆大霉素 50 、 约 ng m l pH 分离、纯化及保存后纯度、得率及活力不足等问 72、37 ℃恒温、95% 空气、5% CO 2 的湿化环境、 题。因此, 如何改进胰岛分离纯化和保存的技术 二氧化碳细胞培养器内培养, 隔日调换培养液。 方法, 是我们急需解决的重大临床问题。本文重 培养 1 周, 可见胰腺外分泌腺萎缩, 培养液中淀 点介绍胰岛细胞分离、纯化、鉴定和保存过程中 粉酶消退, 而内分泌部生长良好。此法操作简 的主要技术和关键问题。 单、经济, 但由于胰腺外分泌部萎缩不完全, 对 胰岛有破坏作用, 并且, 获得胰岛的纯度及质量 1　胰岛移植物的制备 〔3 〕 不高 , 较少采用。 　　胰岛移植始于 1967 年, 当时, L acy 等首先 12　胶原酶消化法 用胶原酶消化技术成功地从鼠胰中分离获得胰 　　胶原酶含有从溶组织梭形芽孢杆菌纯化的 岛。1976 年,N ajo rian 及 Su therland 等首次在 胶原酶、梭菌蛋白酶、类胰蛋白酶及中性蛋白 临床上开展了同种异体胰岛移植术