福建省羊口疮的流行病学调查和PCR诊断.pdfVIP

疾病防治 全国养羊生产与学术研讨会议论文集 353 3讨论 胜等(2006)在重庆地区分离出丝状支原体山羊亚种不 3．1培养基是维持体外细胞生存和生长的基本溶液，是组 同，但都属于丝状支原体族的成员，重庆地区山羊传染 织细胞培养最重要的条件。体外培养细胞所需的一些基 性胸膜肺炎病原较为复杂。同时临床免疫失败现象也时 本物质有氨基酸、维生素、碳水化合物及一些无机离子 有发生，本次分离结果丰富了重庆地区羊传染性胸膜肺 炎的疫病调查数据，为有效控制重庆地区羊传染性胸膜 (司徒镇强等，1996)。多数支原体在生长繁殖过程中利 用葡萄糖或精氨酸作为主要能源，在培养基中添加葡萄 肺炎的疫苗研制增添了新的素材。 糖或精氨酸或尿素及酚红作为指示剂，根据培养基酸化 3．3羊传染性胸膜肺炎，俗称“烂肺病”，此病由条件性致 或碱化而显示的颜色改变情况作为判断各类支原体生 病菌支原体所引起，极易传染，常引发羊群的群体发病， 长的初步特征。支原体快速培养法对肺炎支原体感染的 但死亡率不高，羊只常常呈隐性带菌状态，导致羊群生 早期诊断具有重要的参考价值，本试验运用DMEM细胞 长生产性能下降，体况及免疫力低下，当饲养管理或气 营养液加青霉素分离培养支原体生长效果较好。但是菌 候突变时，可造成大批羊只死亡，给养羊业造成严重的 液浓度还有待进一步测定与提高；支原体菌落观察培养 损失。要控制该病需要从两个方面来进行严格操作，首 方案采甩DMEM半固体基进行混种，结合姬姆萨染液染 先，加强饲养管理是预防本病群发的主要方法，也是非 色进行观察，分离出该病原体的特征菌落，为进行系统 常有效和可行的方法。及时避免和消除应激因素影响， 鉴定而作出结论的标准(CoatasMetal，1987)，该试验直随时注意羊舍通风换气，防止拥挤，保持干燥卫生，适当 接采用姬姆萨染色液进行整个培养基菌落染色，使其形 增加精料、维生素和微量元素及钙磷等，增强机体抵抗 态更易观察更为直观，为现有的支原体菌落形态观察的 力，并坚持场地、羊舍和环境消毒等防疫工作有条不紊 —个创新。 地进行。其次，必须做好羊群的疫苗免疫工作。而国内不 3．2当前确诊羊支原体肺炎的方法主要是病原分离鉴定， 同地区山羊支原体肺炎的病原有很大差异，如福建、重 但是支原体的体外培养成本较高，培养条件要求苛刻， 庆、贵州等地引起山羊支原体肺炎的病原是丝状支原体 且生长缓慢，不能满足快速诊断的需要，PCR技术因其 简便、快速、特异、灵敏的特点，近年来在羊支原体肺炎 四川省山羊支原体肺炎的主要病原是绵羊肺炎支原体 H等建立了一 (王华等，2010)，而在广西等地区造成山羊支原体肺炎的 诊断和监测上应用较广泛。1996年，Hotzel 种快速和特异的检测丝状支原体族的PCR方法，可鉴别 病原是绵羊肺炎支原体和丝状支原体丝状亚种(万一元 L等建立了一 等，2001；刘棋等，2006)，这说明我国山羊支原体肺炎病 丝状支原体族的6个亚群。2008年Sophie 种特异、快速的检测丝状支原体亚种Sc型和山羊支原 原很复杂，虽然政府和养殖户都很重视对该病的防疫， 但支原体性肺炎仍呈地方流行性，预防效果不明显，究 体肺炎亚种的PCR分析方法。2010年，杨发龙等应用丝 状支原体与绵羊肺炎支原体特异性通用引物对临床采 其原因可能是现在采用的灭活苗血清型较为单一，而支 集的鼻拭子及肺组织进行检测发现，绵羊肺炎支原体是 原体各个型(种)之间缺乏交叉免疫保护性(屈勇刚等， 山羊支原体性肺炎的重要病原之一。本次临床分离支原 200