氧化应激诱导HepG2肝癌细胞凋亡的研究.pdfVIP

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2015-08-04 发布于江西
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氧化应激诱导HepG2肝癌细胞凋亡的研究.pdf

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中国病理生理

维普资讯 ChineseJournalofPathophysiology 2008。24(1)：105一l11 · 105 · [A_,tidelid] 1000—4718I2008)01—0105—07 OxidativestressinducesapoptosisinHepG2cells LIGuo—ping△ WU Ling—fei△ ．， PUZe—jin (DepartmentofGastroenterology，SecondAffiliatedHospital，ShantouUniversityMedical Shantou515041，China．E—mail：guopingli8@163．tom) [ABSTRACT] AIM．Directexposureofcellstoreactiveoxygenspeciescaninduceapoptosis．Inthisstudywein- vestigatehow oxidativestressinducescelldeath inHepG2 cellsnadcharacterizethemoleculareventsinvolved．METH- ODS：OxidativestresswsscreatedbyexposingHepG2cellsto2mmol／LH202．Apoptosiswasdeterminedbyanalysisof DNA fragmentationbyagarosegelelectorphoresis．Themitochondrialmembrnaepo tentialwasnaalyzedusingDePsipherflu- orescentstainingnadhteexpressionofcytochromecinthecytosolicfractionwasmeasuredbyWestern blottinganalysis． Th ecaspaseactivitywasdetectedusingfluorometric assay kitbyafuorescencemicroplatereader．RESULTS：When HepG2cellsweretreatedwith2mmol／LH202，htecellsdisplayedDNAfragmentation，atypical featureofapoptosis，after 12h．Themitochondrial memb ranepotentialappeareddifferentintwogroupofcells．H202一treatedcellsappearedgreen fluorescenceas eralyas 4h，whichrepresentsde—energizedmitochondria，hteuntreatedcellsappearedredfluorescence， afeatureofmitochondriawitllinatctmembranepotentia1．Intreatedcells．hteexpressionofcytochromecincreasednadac· cumulatedincytosolicfractionwitlltreatmenttime，caspase一3activityincreasedby6．7一fold(P0．01)at8hnad caspase一9activit