氧自由基对3T3-L1脂肪细胞表达PAI-1的调节及其可能机制.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(6)jlI 一ll [文章编号] 1000—4718(2009)06—1160—05 氧 自由基对 3T3一L1脂肪细胞表达 PAI一1 的调节及其可能机制 陈宝莹 ，魏经国 ， 王 玮 ，XuAmin，魏龙晓。， 崔光彬 ， 于 军 △ (第四军医大学唐都医院放射科，陕西 西安710038；DepartmentofMedicine，UniversityofHongKong，HungKong，China； 第四军医大学教学实验中心，陕西 西安 710032) [摘 要] 目的：研究脂肪细胞中氧 自由基 (ROS)对纤溶酶原激活物抑制物一1(PAI一1)表达的调节，并探 讨其机制。方法：培养3T3一L1细胞，并诱导其分化成为脂肪细胞，以MTF比色法检测细胞的活性。分别以定量 PCR、多重免疫分析及夹心ELISA法检测PAI一1mRNA和蛋白表达的水平，并采用多重磷酸化蛋白分析系统检测 细胞内多种信号分子的蛋白磷酸化水平。结果：HO 可剂量依赖性地增加PAl一1的产生。并且激活了313一L1 脂肪细胞中多种信号转导通路，包括ERK1／2、JNK、Akt、p70S6K及JAK／STAT，其中Akt、JAK／STAT及ERK1／2的 活化可能参与到H：O对于PAI一1的调节过程中。结论：HO 可能通过磷酸化激活Akt、JAK／STAT及ERK1／2， 上调脂肪细胞PAI一1的表达。 [关键词】 自由基；脂细胞；纤溶酶原激活物抑制物 1 [中图分类号] R33 [文献标识码] A RegulatoryeffectsofreactiveoxygenspeciesontheproductionofPAI一1 in3T3一L1adipocytesanditsrelatedpossiblemechanisms CHEN Bao—ying，WEIJing—guo，WANG Wei，XU Amin ，WEILong—xiao ，CUI Guang—bin ．YUJun (RadiologyDepartmentofTangduHospital，FourthMilitaryMedicalUniversity，Xian710038，China；Departmentof Medicine，UniversityofHongKong，HongKong，China；ExperimentTeachingCenter，FourthMilitaryMedcialUnivemity， Xian710032，hCina．E—mail：pclamper@ 163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheregulatoryeffectsofreactiveoxygenspecies(ROS)ontheproductionof plasminogenactivatorinhibitor1(PAI一1)，andtrytodeterminethesignalingcascadesinvolvedinit．METHODS：313 一 L1cellswereculturedanddifferentiatedintomatureadipocytes．CellviabilitywasmeasuredbyMTr．ThePAI一1mR— NAexpressionlevelswereevaluatedbyquantitativereal—timePCR．QuantificationofthePAI一1proteinlevelssecreted intoconditionedmedium wasperfomr edbymultipleximmunoassayandsandwichELISA．Thephosphorylationstatusofpro· teinkinaseswasdetemr inedbyBio—Plexphosphoproteinassays．RESULTS：In3T3一L1adipocytes，H2O2