胰岛素对长骨成骨细胞的影响及受体后机制的研究.pdfVIP

维普资讯 ； ChineseJournalofPathophysiology 2006，22(11)：2251—2255 · 225l · [文章编号】 1000—4718(2006)11～2251—05 胰岛素对长骨成骨细胞的影响及受体后机制的研究 梁立阳 ， 杜敏联 ， 夏 焱 ， 孟 哲 ， 刘 勇 ， 侯玲玉 ， 罗招凡 ， 薛声能 (中山大学附属第二医院 儿‘科， 分子生物室， 内分泌科，广东 广州510120； 中山大学附属第一医院儿科 ，广东 广州 510089) [摘 要】目的：研究胰岛素对长骨成骨细胞增殖和功能的影响并探讨其受体后分子机制。方法：培养生长期 大鼠股骨和胫骨成骨细胞 ，M1Tr法检测不同浓度胰岛素和不同作用时间对成骨细胞增殖的影响，并观察骨钙素、胰 岛素样生长因子(IGF一1)mRNA、IGF一1蛋白合成及成骨细胞胞内 MAPK及其磷酸化的变化。结果：胰岛素 对成骨细胞的增殖和功能的影响具有浓度和时间依赖性，l0 mol／L时促增殖作用最强，96h后细胞增殖进入平 台期。促进骨钙素合成的最佳胰岛素浓度亦为 l0一mol／L，之后骨钙素合成减少。培养时间对骨钙素合成无明显 影响。胰岛素浓度超过l0 mol／L后IGF～1mRNA的表达也明显低于对照组。各胰岛素组的IGF一1蛋 白浓度 均明显高于对照组(P0．05)，但各浓度组间无明显差别 (P0．05)。胰岛素急性刺激成骨细胞后各组的 MAPK表达量无明显差别(P0．05)，但P MAPK磷酸化程度随加入胰岛素浓度的增高而增强(组间P0．05)； 胰岛素慢性处理后各组的P MAPK表达量仍无显著差别(P0．05)，P一4 MAPK磷酸化程度却随着胰岛素浓度 的升高而逐渐下降(组间P0．05)。结论：胰岛素能以生长因子样的作用呈剂量依赖性的方式刺激成骨细胞生长 及功能，但高胰岛素状态以及长时间的胰岛素作用后此种增强效应消失。其受体酪氨酸蛋白激酶介导的MAPK信 号途径参与了促成骨细胞的生长增殖的作用。 [关键词】 成骨细胞 ；胰岛素；胰岛素样生长因子 I；骨钙素；信号转导 [中图分类号】 R363 [文献标识码】 A Effectsofinsulin onosteoblastanditspost．．receptormechanism LIANG Li—yang ，DU Min—lian ，XIA Yan ，MENG Zhe ，LIU Yong ，HOU Ling— yu ，LUO Zhao—fan ，XUESheng—neng (DepartmentofPediatrics，DepartmentofMolecularBiology，DepartmentofEndocrinoloyg，TheSecondAffiliatedHospi一 把ZofSunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China；DepartmentofPedaitrics，TheFirstAffilaitedHospitalofSun Yat—senUniversity，Guangzhou510089，China．E—mail：doctorlly@yahoo．com．ca) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheeffectsofinsulinontheproliferationandfunctionofosteoblastsandtherela— tionshipbetweeninsulinpost—receptorchangeinosteoblastsandosteoblasticcellgrowth．M ETHODS：Theeffectsofdif- ferentlevelsofinsulinonosteoblastswereassessedbyMTFcolorimetry．Osteocalcininmedium wasmeasuredbyRIM． IGF—lmRNA expressionlevelsweredeterminedbyRT—PCR．Theconce