刺五加皂苷B和皂苷E抑制巨噬细胞活化作用的实验研究.pdfVIP

。j薯誊誊 蓦 蓦誊 誊 要 誊 嚣 强 曩 刺五加皂苷B和皂苷 E抑制巨噬细胞活化作用的 实 验 研 究 何春燕 陈晓辉 秦陈浩 展富琴 顾爱萍 朱雪明 (苏州大学附属第二医院，江苏苏州215004) 摘 要 目的：通过体外培养 的巨噬细胞研究刺五加皂苷 B和皂苷 E对 巨噬细胞活化 的抑制作用。方法 ：将经弗波 酸酯诱导人单核细胞 系生成 的巨噬细胞 ，分别加入不 同浓度 的刺五加皂苷 B和 E，另设不加细胞孔为空白组 ，加入细胞 不加刺五加皂苷为对照组 ．采用 MrITr方法检测 巨噬细胞增殖情况，用流式细胞术检测细胞培养上清中Thl，rh2细胞 因 子含量的变化。结果 ：刺五加皂苷B和皂苷 E对 巨噬细胞无明显毒性作用．对细胞增殖没有明显影响 ．但其在低浓度时 (20Wmol／L)即可明显抑制 巨噬细胞分泌 TNF—Ot和 IL一6，且这种抑制作用呈现剂量依赖性。此外 。刺五加皂苷 B和皂苷 E 与 巨噬细胞共培养2h后即可明显抑制 TNF—Ot的分泌，且这种抑制作用随时间延长而增强。结论 ：刺五加皂苷 B和皂苷 E对 巨噬细胞 的活化有 明显的抑制作用 ，有望开发成为抗炎、抗感染及治疗 自身免疫性疾病的新型小分子药物。 关键词 巨噬细胞 刺五加提取物 细胞因子 实验研 究 中图分类号 R285．5 文献标识码 A 文章编号 1672—397X(2013)12—0071-02 巨噬细胞是天然免疫系统重要 的效应细胞之一 ．具有免 提供实验依据。 疫防御、免疫监视 、免疫调节 以及抗原呈递等多种免疫功能， 1 实验材料 在机体的免疫系统中起重要作用 。但是 ，巨噬细胞过度活化 刺五加皂苷 B及刺五加皂苷 E标准 品 (纯度大于 会分泌大量的TNF一 、IL一6等炎性细胞 因子 ，最终会引起局 98．0％，购于成都瑞芬思生物科技有限公司)；96孔细胞培养 部组织的炎症反应 。有文献报道刺五加提取物具有抗肿瘤 、 板 (Coming，USA)；胎牛血清 (BIOCHROM，German)；RPMI 调节免疫功能、抗炎镇痛 、降血糖及延缓衰老等药理作用 1【l。 1640培养基 (GIBCO，USA)。细胞 ：THP-1(人单核细胞系)由 本课题组前期在活性筛选 中发现 ．刺五加提取物具有一定的 苏州大学血液研究所惠赠。试剂 ：PMA (弗波酸酯 ，Sigma， 抑制巨噬细胞活化的作用 。刺五加皂苷 B和皂苷 E是刺五加 USA)，M1丫r (噻 唑蓝 ，Sigma，USA)，DMSO (二 甲基 亚砜 ， 中重要 的有效单体成分 ，但是 目前对该两种单体成分抑制 Sigma，USA)，Th1／rh2细胞因子检测试剂盒 (BD，USA)。仪 巨噬细胞活化作用的研究还未见文献报道。本研究对刺五加 器 ：流式细胞仪 (FACScalibur，BD)，酶标仪 (TECAN，China)。 皂苷 B和皂苷 E抑制 巨噬细胞活化的作用进行研究 ，检测两 2 实验方法 种单体成分对细胞 因子、炎症介质 的调节作用 ，为后期开发 2．1 THP一1细胞诱导及实验分组 用含 10％胎牛血清的 基金项 目：国家 自然科学基金 (NSFC)；江苏省 自然科学基金 (BK2012171)；江苏省高校 自然科学研 究项 目 (12KJD310006) 态反应进程 的作用 ，此可能为针刺治疗变应性鼻炎的作用机制 (3)：222 之一．但针刺治疗变应性鼻炎远期疗效是否 比西药好还需进一 [5] 朱玉琴．过敏性鼻炎 ：过敏性鼻炎当责之肺脾 肾．中医杂志 ， 步做大样本和延长观察治疗时间的实验研究 。