耐伊维菌素捻转血矛线虫谷氨酸门控氯离子通道gbr-2基因分析.pdfVIP

ChineseJournalofVeterinaryMedicine 中国兽医杂志 2015年 (第51卷)第1期 l1 耐伊维菌素捻转血矛线虫谷氨酸 门控氯 离子通道 gbr一2基 因分析 李 斌 ，冯伊莉 ，杨晓野 ，杨莲茹 ，刘鑫远 ，王 瑞 (1．内蒙古农业大学兽医学院，农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室 ，内蒙古 呼和浩特 010018； 2．内蒙古鄂尔多斯市动物园 ，内蒙古 鄂尔多斯 017000) 摘要 ：为了解谷氨酸门控氯离子通道 (Gluc1)gbr一-2基因在捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株是否存在突变，以及变异情况如 何，本试验以捻转血矛线虫耐伊维菌素虫株作研究对象，提取基因组DNA后以特异性引物扩增gbr-2基因，并对扩增产物进 行测序和分析。同时以敏感株虫体作对照。试验结果表明，与对照组相比，耐药株的基因序列发生了突变 ，在80～170bp处 出现多处突变；在 192~207bp处的碱基发生丢失。两者同源性为88．9％。试验结果说明，捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株的 谷氨酸门控氯离子通道gbr一2基因确实存在突变，为进一步了解捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株的耐药性分子机制，以及筛选 耐药性检测的分子标记，建立耐药性的早期检测手段提供重要数据。 关键词 ：捻转血矛线虫 ；耐药性 ；伊维菌素 ；谷氨酸门控氯离子通道 ；gbr一2基因 中图分类号：$858．27 文献标志码：A 文章编号：0529—6005(2015)01—0011-03 AnalysisofGlutamtae-gatedChannelgbr-2Genefrom Haemonchuscontortuswithivermectinresistance LIBin，FENGYi—li，YANGXiao—ye，YANGLian—IU，LIUXin-yuan，WANGRui。 (1．KeyLaboratoryofClinicalDiagnosisandTreatmentTechnologyinAnimalDisease， MinistryofAgriculture；CollegeofVeterinaryMedicine，InnerMongohaAgricuhuralUniversity， Hohhot010018，China；2．ZooofErdosCity，Erdos017000，China) Abstract：Tounderstandthechangeofglutamate—gatedchloridechannel(Gluc1)gbr一2geneinthestrainsofHaemonchuscon— tortuswithivermectinresistance，Haemonchuscontortuswithivermeetinresistancewerechosenforthisstudy．Firstly，genomicDNA wasextracted，thengbr-2genewasamplifiedandsequenced．Thecontrolgroupofsensitivestrainwasalsoused．Theresultsshowed thatthegenomicDNAofbothstrainswassuccessfullyextracted．Thenthegbr一2genewassequencedandthereweresomemutations in80—170bps．Thehomoloyg ofthetwostrainswas88．9％．Allthoseindicatedthatglutamate—gatedchloridechannelgbr一2geneof Haemonchuscontortuswithivermectinresistancewaschanged．Soitwouldprovidesomebasicdataofrunderstandingsofthemolecu— larmechanismsandtheuseofmolecularmethodsfortheearlyidentificati