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苍术综合化学模式识别 　　[摘要] 运用气相色谱-质谱指纹图谱相似度评价法?系统聚类分析法?主成分分析法和判别分析法建立苍术药材的综合化学模式识别方法?采用气相色谱-质谱法，DB-wax毛细管色谱柱（0.25 mm×60 m， 0.25 μm），质谱条件为EI离子源，电子能量为70 eV，建立苍术GC-MS指纹图谱，并以33批药材的共有色谱峰面积为依据，建立其系统聚类分析方法?主成分分析方法和判别分析方法?结果表明指纹图谱法可以区别不同品种及产地苍术，系统聚类分析与主成分分析及判别分析法所得的结果一致，均能很好地区分道地茅苍术?非道地茅苍术和北苍术?因此，所建立的综合化学模式识别方法可用于苍术的质量控制及品种评价? 　　[关键词] 苍术；GC-MS；综合化学模式识别；质量控制与评价 　　[收稿时间] 2014-03-17 　　[基金项目] 国家自然科学基金项目81130070；江苏大学第十二批学生科研立项一般项目（Y12A152） 　　[通信作者] 欧阳臻，教授，博士生导师，主要研究中药活性成分研究及新药开发，Tel：（0511E-mail： zhenouyang@；郭兰萍，博士，主要研究中药资源生态学，E-mail：glp01@126.com 　　[作者简介] 王?，硕士研究生，TelE-mail： wfan1988@ 　　苍术Atractylodis Rhizoma是菊科植物茅苍术Atractylodes lancea （Thunb.） DC.或北苍术A. chinensis （DC.） Koidz.的干燥根状茎?苍术具有燥湿健脾?祛风散寒?明目的功能?用于湿阻中焦，脘腹胀满，泄泻，水肿，风湿痹痛，风寒感冒，夜盲，眼目昏涩[1]?茅苍术主要分布于江苏?湖北?河南?安徽?浙江?江西等省；北苍术主要分布于内蒙古?河北?山西?辽宁等省?苍术资源分布广泛，是一个受地理环境影响很大的复合体[2-3]，茅苍术与北苍术的化学成分存在很大变异[4-8]，其药效也有显著差异[9]?而通过外观形态难以区分苍术质量的优劣，导致药材混杂的现象较为普遍?因此，对苍术进行质量控制和品质评价具有重要意义? 　　中药化学成分复杂，采用单一的模式识别方法来表征药材的质量会存在一定局限性?综合多种模式识别方法，可以客观的反映不同因素对药材品质的影响，为药材质量控制和评价提供科学依据?本文以不同产地的33批茅苍术与北苍术样品为基础，综合运用指纹图谱相似度评价?系统聚类分析?主成分分析和判别分析等化学模式识别方法，以期建立苍术药材的质量控制与评价体系? 　　1 材料 　　美国Agilent 6890N气相色谱仪和5973型质谱联用仪（GC-MS）?石油醚，乙酸乙酯为色谱纯? 　　苍术药材分别采自江苏?安徽?湖北?陕西?河南?内蒙古?辽宁?河北?山西等地33个不同地区?不同品系苍术，见表1?考虑到物候期对苍术根状茎挥发的影响，所有苍术样品均在2011年7月至10月在茅苍术和北苍术的花期时采集，所有样品均经安徽中医药大学彭华胜教授鉴定? 　　2 方法 　　2.1 供试品制备 　　分别取不同产地苍术药材粗粉约5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入石油醚150 mL，超声（功率160 W，频率50 kHz）3次，每次30 min，合并提取液，抽滤，回收石油醚后得挥发油?取挥发油样品100 mg于5 mL量瓶中，加入醋酸乙酯至刻度，得供试品溶液，0.45 μm滤膜过滤后供GC-MS 分析用? 　　2.2 色谱质谱条件 　　色谱条件：DB-wax毛细管色谱柱（0.25 mm×60 m，0.25 μm）；载气为氦气（99.999%），流速1 mL?min-1；进样口温度250 ℃；检测器温度250 ℃；柱温：起始温度为85 ℃，保持5 min，以3 ℃?min-1升温至185 ℃，保持5 min，再以10 ℃?min-1升温至250 ℃，保持5 min?质谱条件：EI离子源，源温230 ℃，电子能量为70 eV，连接器温度280 ℃，扫描范围m/z 33～350，电子倍增器电压为2 400 V?用峰面积归一化法定量? 　　2.3 方法学考察 　　2.3.1 精密度 按照2.1项下的方法制备L1号样品供试品溶液，连续进样5次，比较共有色谱峰的相对保留时间和相对峰面积，各共有峰的相对保留时间 RSD0.49%，相对峰面积比值 RSD 平均值3.3%，表明该仪器的精密度良好? 　　2.3.2 稳定性 按照2.1项下的方法制备L1号样品供试品溶液，分别在制备后 0，2，4，6，8 h 进样，比较各共有色谱峰的相对保留时间和相对峰面积?各共有指纹峰的相对保留时间