基于质粒表达的siRNA对猪圆环病毒2型复制的抑制作用.pdfVIP

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2015-08-23 发布于安徽
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基于质粒表达的siRNA对猪圆环病毒2型复制的抑制作用.pdf

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动物医学成了严重威胁，但当前缺乏有效的防治手段。为了探索治疗PCVAD的新途径，分别针对PCV2 siRNA表达质粒与阴性对照质粒转染PK-15细胞，转染质粒20h后感染PCV2。结果质粒表达的特异siRNA抑制了PCV2 DNA的合成及Rep和Cap蛋白的表达，使病毒滴度(TCID舶)显著下降；针对靶基因不同位点的siRNA的抑制效果不同；病毒感染后36h内，siRNA对PCV2的抑制作用最强，随后有所下降，但直至感染后60h仍然能够显著抑制PCV2复制。实验结果提示质粒表达的特异siRNA能够显著抑制PCV2的增殖，但这种抑制功能与作用时间呈负相关。关键词PCV2；siRNA；表达质粒；抑制作用；负相关 InhibitionofPlasmid—basedsiRNAonPorcineCircovirus Type2(PCV2)Replication LI Man，SONG Yu-zhu,LI Qin-ye·，LIYan-qin，ZUOTan-qing ofAnimalScienceand (College Technology,AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071001) of Abstract：Porcinecircovirus essentialcausative PCV2一associateddisease type2(PCV2)，the agent madea threattotheworldwideswine noefficacioushasbeenfound (PCVAD)，hasgrave industry,but therapy to totreatthisviralinfection．Toanew treat exploreapproach and siRNAtoPCV2and encodevirus pGeusil-C490)encodingrep capgenes，which a and constructed谢m PCV2- proteincapsid(Cap)proteinrespectively,were siRNAasa contr01．PK-15cellswere transfectedwithdifferent nonspecific negative respectively PCV2-specif- icsiRNA and andthesecellswgreinoculatedwithPCV2 liposome expressionplasimidsnegativeplasmidsby al20h siRNA DNA of inhibited post-transfection．Plasmid-basedPCV2-specificsignificantly synthesis．Rep and ofPCV2andreducedvirustiters i