人脐血间充质干细胞体外诱导分化为类雪旺细胞的初步研究.pdfVIP

解剖与临床 2011年 2月第 16卷第 1期 AnatomyandClinics．Feb．2011。Vo1．16No．1 37 人脐血问充质干细胞体外诱导分化为类雪旺细胞的 初步研究 仇大鹏 肖玉周 荩金项 f_；j：安徽省Jt牛厅医学科研重点项 目(2010A015) j 作者单位：233004 安徽蚌埠，蚌埠医学院第一附属医院骨科 组织移植安徽省重点实验室 (仇大鹏 、肖玉周)；蚌埠医学院第二附属医院 。 骨科 (仇大鹏) 作者简介：仇大鹏 (1980一)，男，住院医师，医学硕士，研究方向：周围神经 通信作者：肖 周，E—mail：XiaoYuzhoul@yahoo．com．cn 【摘要】 目的：体外定向诱导人脐血问充质干细胞 (HUCBMSCs)，分化为类雪旺细胞(SC—like)。 方法：(1)采用 Ficoll密度梯度离心法分离健康产妇脐带血中单个核细胞进行体外培养，用流式细胞术 检测细胞表达的表面抗原CD90，SH2，CD34和CD45。(2)第3次传代所得的HUCBMSCs，加入加有 B一 巯基乙醇(B—ME)、全反式黄酸 (RA)、Forskolin、b-FGF、PDGF、HRG的含 10％胎牛血清 (FBS)的低糖 DMEM培养基 (L—DMEM)诱导，7d后免疫组织化学染色法检测。结果：(1)HUCBMSCs在体外培养以梭 形细胞为主；流式细胞仪检测显示，细胞高表达表面抗原 CD90和 SH2，低表达表面抗原 CD34和CD45。 (2)诱导7d后 ，细胞免疫组化显示，GFAP阳性率为81．88％ ±2．43％。结论 ：在一定条件下 ，HUCBM— SCs可以在体诱导分化为SC—like，组成人工神经，移植修复周围神经缺损。 【关键词】 脐血；人脐血间充质干细胞；类雪旺细胞；诱导；分化 doi： 10．3969／j．issn．1671—7163．2011．01．010 【中图分类号】 R329．24 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-7163(2011)01-0037-04 ExperimentalStudyontheDifferentiation ofHumanUmbilicalCordBloodM esenchymalStem Cells intoSchwannCel1．1ikeinVitro QIUDa-peng，XIAOYu-zhou．DepartmentofOrthopaedics，theFirstAffiliatedHospitalofBengbuMedicalCol— lege，AnhuiKeyLaboratoryofTissueTransplantation，Bengbu，Anhui233004，China 【Abstract】 0bjective：Toinducethehumanumbilicalcordbloodmesenchymalstemcells(HUCBM— SCs)todifferentiateintoschwanncell—like(SC—like)invitro．Methods：(1)Mononuclearceilswereseparated from umbilical cordbloodofhealthyparturientsbyFicolldensitygradientcentrifugationandculturedinvitro． TheexpressionofsurfaceantigensCD90，SH2，CD34andCD45weredetectedbyflowcytometry(FCM)．(2) Thethirdpassagecellswereculturedinlowcarbohydrates—Dulbecco，smodifiedeagle，smedium (L—DMEM) containing10％ fetalbovinesel31m(FBS)，B—mercaptoethanol(—ME)，retinoicacid(RA)，forskolin，basic fibroblastrgowthfactor(b-FGF)，platelet—derivedgrowthfactor(PDGF)andheregulin(HRG)．On7thday， thecellswereidentifiedbyimmunocytochemistry．Results：(1)Themajorityo