SOCS-1和RIZ1基因启动子区CPG岛甲基化与胃癌发病的关系.pdfVIP

46· *十“±日H№S∞’nK{Ⅲ％±}}日H±☆jm 2mou 有控制细胞生长厦抑制*相发±∞作Ⅲ。RIZIg日P％c4与PCR匣应悼乐§催秘20IIL，其中也插I×lⅢ肛…0 LdNlT、0．2mmoI，L…物、25…vI、I西12、0．5ulnq∞、#饰 DNA结台，*制其转m。mfRIZlW’Rh蛋门结弁，RIZI§ n潜“∞女色体Ⅷ控＆转m抑制9l制与I{b转录“I卫RIZI罄后∞DNA模《。SOCS-IPCR反＆条件为一第一托{r口，95t DNA※台麟，M’，Ⅻc． ⅢF物能*＆Ⅷ胞C,J^t期m滞并诱#Ⅻ胞删t“。t年柬m预变性5…手动热启动Taq 593℃30s 30 多*究州SOCS-I目RIZI基日##制多种肿喻如船、胰72ts进行35十话Ⅱ最^72℃《仲5min． DNAR音∞， 腺墙、乳腺癌””等肿瑜Ⅻ胞±E∞活¨佴十J共SOCS-I自第二轮r增，95℃m空性5…i手动璁瑞动Taq 雎，#目甲梁化与目癌*系的研究报道较少o“。 m95℃30自63℃30s．72℃30s进{r32十德“最月72℃ Ⅱ仲5min。MZIPCB反应条件为：95t确变性5mia手动热 L l瓷料与方* DNA聚合酶，按95t 启动Taq 116康☆# 进行35十循环．最后72℃延忡】0rMn。 Sssl： 病例m：来碌f南牵市中大Ⅸ院、鼓楼Ⅸ院、Ⅱ苏首舯捕 取时lEⅢm样提啦外胤mDNA，用cpc■基化m(M Ⅸ院等。％倒日癌病例均＆病Ⅻ或内镜诊断确诊为蝌发性目 修饰．使其CpG岛垒部发生■耩化．修饰E进行Ⅱ吼№氢盐修 癌新发病例，韭中男性醣例，女性28侧。年龄昂大为86岁． 饰、纯化，W☆同前述．得到的DNA作为目性对M．ddHm代 年龄＆小为38岁，平均年龄为＆岁。 替楼板为刚性对照，与目癌组自对lH组的样本同时进行PCB。 对月m按1：l“＆，＆Ⅸ窿内瞄机选取与患者同K嫉、扩镕产物H3％∞琼脂糖凝腔电诛．耶染色，H凝胶成像分析 同性别、年*差别小f5岁Ⅱ目住地相《的非消化遭系统 仪(UVI)观察分析电诛结果。 1．23坑”学#析实验结果采用SPSSl3．0统计轼件处理，用 病、非肿瘤患者96例。年酷盛大为80箩，年龄最小为30岁， 平均年龄为55岁。 卡方或Fisher精确概率检验，a=0．05为检§水准。 1 2 i* 1 2结* 2l外月^§日mDNA*n＆心者来经化疗或破疗时抽取 21 研究对象外删m3mL，EDTA*＆．加^“目胞裂解渣裂解红SOCS-I÷RIZI基目e自}r基*n态奇析 细胞．由0适盘∞礴瞳盐埋冲涟清洗Ⅸ淀。∞^抽据液ⅡⅢ白 奉实验检测T96倒胃癌＆其相对应的对照外州mDNA抑 酶K充分悬浮沉淀，37℃水浴2h，¨^醋酸钠沉淀蚤自质． 10000 rpm离010rain后取J|清加^异丙酵抽提DNA；# 后12000mm离心10rain后击i清，