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第十届全国环境与职业医学研究生学术研讨会论文集 · 19·
1.6基因多态检测
常见的单核苷酸多态位点Ar9194TW、Ar9280His和Ar9399Cln,
可导致XRCCI蛋白氨基酸序列改变,会影响XRCCl蛋白的正
常活性,从而影响DNA损伤修复能力[6】。06_甲基鸟嘌呤.DNA
甲基转移酶基因(MGMI)在保护细胞免受烷基化突变方面起
关键作用。最易被烷化的是DNA分子上的鸟嘌呤,可形成06_
码子多态。50
甲基鸟嘌呤加合物,MGMT能将DNA分子上的烷化基团转移
到自己的半胱氨酸上【7】。MGMT基因的单核苷多态性与接触致7.5旺,ddH205.7止组成15此反应体系。
XRCCl Leu84Phe反应条
癌物人群的癌症风险有关。关于DNA修复基因多态性与氯乙 Ar9194Trp。Ar9399C,ln。lVIGMT
烯接触工人的染色体损伤之间关系的研究相对较少,本研究旨
25s,最后72℃延伸lOmin。XRCCl
在探讨氯乙烯累积接触水平对氯乙烯致工人染色体损伤的关 Ar9280His退火温度为
系,以及hOGGl,XRCCl和MGMT基因多态的影响,为VCI69t2,hOGGI
Ser326Cys退火温度为65℃,其余反应条件同上。
易感人群的保护提供敏感指标。 扩增结束后,每个样品取5皿,2%的琼脂糖凝胶电泳,检
验扩增效果。然后另取10此,加入10单位限制性内切酶,和
l对象与方法 1皿的酶切缓冲液(购内切酶时附带),37。C水浴过夜消化,然
1.1研究对象 后消化产物在3%琼脂糖凝胶电泳。溴化乙啶染色紫外灯下拍
选择上海某化工厂接触氯乙烯工龄超过1年,并完整填写 照鉴定产物。
调查表、抽取血样及成功完成胞质分裂阻滞微核试验和PCR-
RFLP的工人作为研究对象,共获得符合条件的工人313人。选hOcGl Leu84Phe。
择与氯乙烯接触工人在年龄,性别,吸烟,饮酒情况上无差异
并且无氯乙烯接触史的该厂后勤管理和服务人员141名,进行 表1各多态位点的引物及基因型
胞质分裂阻滞微核实验以评估其染色体损伤。 多态位点 引物序列(5’.3’) 基因型 酶切后DI、IA片段
1.2问卷调查与体检 F:5’-C,LLL乙G’rCCCA‘; 缸g『Al苫346bp。37bp
采用统一的健康体检表,对每个研究对象的一般情况、生 艘鲫J舛CRT:A5-_cccccAcAccc1Tr
CACT_3’ r,ptrrl,383bP
活习惯以及家族史、个人既往病史,职业史等情况进行调查。 ” ’F:5,耵cIGC’唧“宅衍
AI】啦喀拼bp,1褡bP…飞门
体检包括常规项目和肝B超。 2J瓯CCI 舢帕n4153bp.:277bp.1硒bp{
399雾‰TccAcccTTTTc
1.3个人累计接触剂量
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