微生物转化人参根总皂苷为稀有皂苷C-K和Rh1.pdfVIP

第2O3l31卷年 6第月2期 ()1．j＼()．：! 』UI1．2Oll = 一 一 微生物转化人参根总皂苷为稀有皂苷 C—K和 Rhl 侯耀达 ， 费丽坤 尹成 日 (延边大学长 自山生物资源与功能分子教育部重点实验室 吉林 延吉 l33o02 摘要 ：从 7年生林下参根部分离的菌株对人参根总皂苷进行微生物转化 ，结果发现一株霉菌 GS1 33能钉效 地将人参根总皂苷转化为人参稀有皂苷 c—K及 Rh1．对最佳转化条件进行测定．在水为培养基 ，pH值为 3．() 时。菌株 GS1—33生成 c—K 的最大产率为 l4 ，生成 Rhl的最大产率为 25 ．确定人参稀有皂苻 C…K是 对人参皂苷 Rbt、Rc和 Rd的作用产生，稀有皂苷 Rhl是对人参皂苷 Rgl和 Re的作用产生． 关键词 ：发酵；人参根总皂苷 ；稀有皂苷c—K；稀有皂苛 Rhl 中图分类号 ：$567．5 1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004～7999(20l1)02～0108—04 人参 (PanaxginsengC．A．Meyer)为五加科人参属多年生草本植物 ，是传统名贵中药 ，人参根总皂：是 由人参根部提取的皂苷，即人参根皂苷，主要含有人参二醇类皂苷 Rbl、Rb2、Rc、Rd，人参三醇类 苷 Rgl、 Re、F1等．20(S)原人参二醇一2O—O一口一I)一吡喃葡萄糖苷 (人参皂苷化合物 compoundK，简称 C—K)是 人参二醇组皂苷的次生代谢产物，其在体内、体外均具有 良好的抑制癌细胞生长作用和抗癌细胞转移作l}{]， 是一种较有开发前景的抗癌新药 [1]． 实验证明，给大鼠或人VI服人参皂苷 Rgl后 ，其在肠道内被肠 内菌代 成人参皂苷 Rfl、Rhl干¨原人参 三醇等代谢产物 ，人 口服 Rgl后其吸收入血L的代谢产物为人参皂苷 Rhl ，人参皂苷 Rh1 仃 进树尖 细胞前体细胞移行和发育成熟、增加树突状细胞分泌IL一12P40蛋 白、mRNA转录及增强 lI一2 PHA激 活的杀伤细胞 (DC—LPKA)杀伤肿瘤的作用 ]，并且能够增加 IL一1水平和 TNF~mRNA 的表达 ． 此 ，对 Rhl的药理作用 ，特别是对其抗肿瘤作用及其作用机制值得深入研究． 本文利用从 7年生林下参根部土壤中分离的菌株对人参根总皂苷进行微生物转化 。评 对转化条什进 行优化，分析稀有皂苷 C—K和 Rhl的来源． 1 材料与方法 1．1 仪器 BSC～l300IIA／B3型生物安全柜 (上海博迅实业有限公司医疗设备厂)；SPX…25OB…Z型牛化培养确 (上海博迅实业有限公司医疗设备厂)；HZQ—C型全温振荡器 (中国哈尔滨东联 电子技术卅：发钉限公卅ji Agilentl100型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司)． 1．2 材料 人参根总皂苷、人参皂苷 Rbl、Rb2、Rc、Rd、Rgl、F2、C～K标准 品，由成都思科华生物技术有限公州提 供 ；薄层层析，板 由德国Merck公司提供 ；其他化学试剂均为分析纯． 1．3 方法 1)菌株的分离及产 一葡萄糖甘酶菌株的筛选 利用 10倍分离 的方法从林 参根 ：{l|壤 1J舒凼纯化 菌株 ，Esculin—R2A琼脂用于产 i3一葡萄结甘酶菌株的筛选．Esculin…R2A琼脂包括：L叫诗 1g、,iq：豫敬议 0．5g、R2A琼脂 15．2g、水 1L，在 121℃高压蒸气灭菌锅r灭菌 15rnin．筛选原理是产 …衙拘糖fjl商的蒲 株在七叶苷的作用下能产生葡萄糖和七nP苷元 ，而七 ⅡH7uJ~到铁离子变黑．通过颜乜Hijuj判断． 收稿 日期 ：20ll—O3…25 基金项 目：匿冢 臼然科学齄 t20Sd2017)；吉林省干葺技发艇 I面}{ 作者简介 ：侯耀达(1987一)，女，吉林辽源人 ．延边 赶学 学 ， 读坝士．尹成 日为通I 譬 ． Tel：04