细菌光敏色素Agp1的改造及其近红外荧光检测.pdfVIP

细菌光敏色素Agp1的改造及其近红外荧光检测.pdf

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光谱学与光谱分析 第34卷 多余BV。 白,其最大吸收峰在280nm左右。虚线代表了加入BV后的 1.3光转换行为及近红外荧光检测 吸收光谱,很显然在400和700nIn左右分别出现了BV的 在绿光保护下,首先检测Pr态的紫外一可见、近红外吸 Soret带和Q带吸收。经过NAP-10脱盐柱纯化后的色素一蛋 收光谱及近红外荧光发射光谱;然后采用红光照射lrain, 白复合物的吸收光谱见图1A中点线所示,此时吸收光谱对 检测光转换后的近红外荧光发射谱及吸收光谱。检测荧光时 于的状态为Pr态。 激发波长为680nm,入射、出射狭缝均为2.5nm,扫描速度 经过红光照射2rain后,Pr态转换成Pfr态。通过比较 000 为l nm·rain。 两者的差谱[见图1(b)中的点线],我们发现Pfr态的Q带最 大吸收红移至754舳左右。不同突变体在680rim激发下的 2结果和讨论 近红外荧光发射光谱,最大荧光发射峰均出现在~715啪 左右;此外,红外照射后均导致近红外荧光发射减弱。不同 图l(a)显示了BV组装前后Agpl体系的紫外一可见、近突变体荧光发射的差异尚待深入研究。 红外吸收光谱变化,其中实线代表了表达纯化后的脱辅基蛋 SJ,VenerAV,VierstraRD。eta1.Science.,1999,286(24):2517. [1]Davis S,VuilletI.,eta1.Bio.Chem.,2005,280(37):32389. [2]GiraudE,Zappa K F V a1.Cherm [33PiatkeviehD,SubaehV,VerkhushaV,et Soc.Rev.,2013,42(8):3441. K F V [43PiatkeviehD,SubaehV,VerkhushaV,eta1.Nat.Cornmun.,9013,4:Z153. G A,Xia S,KrumholzJ,etat.Angew,Chem.Int.EdEn91.,2012,51(6):1448. Is]Filonov NIRFluorescenceDetectionof Modificationand Agpl HAN Tin91,FENGJuanh,TilmanLampartefl 1.LifeScienceand 610054,China Technology,UESTC,Chengdu Instituteof 2.t30tanicI instituteKarlsruhe Technology,Germany invariousbacteria. Abstract bilividin-containingproteinphotoreceptorwidelyoccurring Bacteriophytochromes(BphPs)are make tored andfarred evolutionhasbeencarriedouton intheenhance— can light.Directed BphP,resulting They responselight its

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