RSV基因在本烟中的表达及RSV侵染对灰飞虱免疫相关基因表达的影响.pdfVIP

目录 目录 摘 要……………………………………………………．．………………．．…．．．．．…．．…………………．．．……．I Abstract………………………………．．………………．．………………………．．…．……．…………………．III 第一章文献综述……………………………………………………………………………………。1 1．1水稻条纹病毒的研究进展……：………………………………………………1 1．1．1寄主范围、症状及分布………………………………………………．．1 1．1．2病毒粒子性状及分类地位……………………………………………．．2 1．1．3水稻条纹病毒的分子生物学研究概况………………………………。3 1．2介体昆虫先天免疫的研究概况………………………………………………8 1．2．1昆虫的先天免疫反应及途径…………………………………………。8 1．2．2昆虫免疫相关基因的研究现状………………………………………。8 1．3荧光蛋白在生物学研究中的应用…………………………………………．．10 1．4实时荧光定量PCR技术……………………………………………………．12 1．4．1实时荧光定量PCR技术原理…………………………………………．12 1．4．2Real—time PCR荧光检测方法…………………………………………13 1．4．3 Real—time PCR定量方法………………………………………………15 1．4．4Real-time PCR应用前景………………………………………………15 1．5本研究的目的和意义………………………………………………………．．16 第二章RSVCP和舰，基因在本氏烟中的表达与定位………………………………．18 2．1材料与试剂…………………………：………………………………………．18 2．1．1 RSV病株采集…………………………………………………………18 2．1．2菌株和质粒……………………………………………………………18 2．1．3抗体来源………………………………………………………………18 2．1．4主要试剂………………………………………………………………18 2．2实验方法………………………………………………………………………．19 2．2．1目的基因的克隆………………………………………………………．19 2．2．2重组表达载体的构建…………………………………………………22 2．2．3农杆菌介导的瞬时表达………………………………………………．22 2．2．4 GFP荧光表达和激光共聚焦观察……………………j………………23 2．2．5 Western．blot分析…………………………………………………………………………23 2-3结果与分析…………………………………………………………………．．26 2．3．1表达载体的构建………………………………………………………26 2．3．2 CP和SP在本氏烟叶片表皮细胞中的瞬时表达……………………．27 南京师范大学2010届硕士学位论文 2．3．3 CP和SP在本氏烟叶片表皮细胞中的定位与共定位………………．30 2．4讨论……………………………………………………………………………………………………32 第三章灰飞虱体内mucin表达与RSV侵染的相关性分析……………………………．34 3．1材料与试剂…………………………………………………………………。34 3．1．1试验材料………………………………………………………………34 3．1．2主要试剂………………………………………………………………34 3．2试