依达拉奉对惊厥持续状态幼年大鼠海马IL-1β和NF-κBp65表达的影响.pdf

温州医学院硕士研究生论文 依达拉奉对惊厥持续状态幼年大鼠海马IL-113 和NF．KBp65表达的影响 研究生：王海萍 导师：李光乾教授 林忠东副教授 叶秀云副教授 温州医学院附属育英儿童医院神经内科 中文摘要 响；2．探讨IL--113和啪p65在惊厥性脑损伤中的作用及其关系。 方法：雄性SD幼年大鼠195只，分为生理盐水对照组(NS组)、‘惊厥持续状态组(SC 组)和依达拉奉组(ED组)三大组；其中NS组、SC组和ED组又均随机分为5 个亚组，分别于晾厥后4h、12h、24h、48h和72h处死。采用氯化锂一匹鲁卡品法 制作惊厥持续状态模型：幼年大鼠按127m蝴0量腹腔注射氯化锂，18h后按 1m蝴U量腹腔注射硫酸阿托品，30min后按100mg／lq葑U量腹腔注射匹鲁卡品； 观察大鼠行为学变化，记录各组大鼠附京厥率、惊厥潜伏期、惊厥程度分级、 惊止时间及死亡隋况。选择喇欢发作达到Ⅳ～V级，且终iE惊厥发作后状态良 好的大鼠为合格sC大鼠模型。D组在大鼠造模前三天予ED 5m鲫唾姗注射， 每天注射一次，连续3天。NS组用生理盐水代替氯化锂及匹鲁卡品，其他处理 同SC组。大鼠于氐噘后各时间点处死；光镜、电镜和1f【】NⅡ．法检测观察大鼠海 2 温州医学院硕士研究生论文 马病理学改变及细胞凋亡情况；免疫组化法检测海马CAl NIL-113秘T-rJ3p65 mRNAa*6盘的动态变化。 蛋白表达动态变化；R1渖CIR技术检测海马N】h①p65 结果：1．惊厥持续状态模型的建立：注射匹鲁卡品后，有9只(9／130)大鼠未成功诱 厥发作。造模后死亡大鼠10(10／130)只，其中2只于!_惊厥后4h死亡；2只于惊 厥后12h死亡；1只于晾厥后24h内死亡；3只于48h死亡；2只死于惊厥后72h；总 死亡率为7．69％(10／130)，造模成功率85．4％(111／130)。 2．日E染色：NS组大鼠海马CAl区锥体细胞层次清晰，排列整齐，神经元轮廓 清晰，胞核大而圆。SC组大鼠出现不同程度的神经元变性及丢失，以海马CAl 区最显著，惊厥后4h少量神经元肿胀；12h排列欠整齐，受累数增加；24h胞 浆胞核空泡化；48h细胞不规则，见红色神经元及空穴；7211有所减轻。ED组 各时间点总体比sC组减轻。 3．电镜：NS组大鼠海马CAl区神经元及神经胶质细胞结构清晰，胞膜及核膜 完整光滑，核染色质分布均匀，胞浆内线粒体，高尔基体和内质网等细胞器丰 富。SC组表现为：惊厥后4h神经元毛细血管周围水肿，12h部分内质网轻度 扩张，个别线粒体轻度肿胀；24细胞间隙扩张，部分内质网和线粒体扩张；48h 以后内质网扩张较前有所减轻，线粒体肿胀有加重。ED组各时间点改变均较 SC组减轻。 mRNA表达无明显变化，SC组 4．RT-PCR检测结果：NS组海马NV-诏p65 于：惊厥后4h开始少量增加，24h达高峰，之后缓慢下降，72h降至正常；13J)组 或P0．01)；ED组除24h时间点外，其余各时间点与NS组表达无明显差别。 5．免疫组化检测结果： 5．1m-ll，蛋