斑蝥酸钠对人多耐药k562aolt;,2gt;细胞的体外作用及其机制研究.pdfVIP

中文摘要 斑蝥酸钠对人多药耐药K562／A02细胞的体外 作用及其机制研究 摘 要 目的：肿瘤化疗失败的原因往往是多药耐药(MDR)的出 现，因此有效地控制MDR的发生已成为肿瘤治疗的关键。 目前开发的MDR逆转剂因毒副作用大或作用靶点单一等而 无法达到令人满意的程度。中药因资源丰富、低毒、作用靶 点多、价格便宜等优点，已成为目前肿瘤MDR逆转剂研究 的重点。本研究拟通过体外实验观察中药斑蝥酸钠(SCA)对 人多药耐药K562／AO：细胞是否有逆转作用，并初步探讨该 中药逆转MDR的可能机制。 方法：选取经典的耐药细胞系一人多药耐药K562／A02 细胞株及相应的敏感株K562，采用四甲基偶氮唑蓝(Mrr) 择对两株细胞的杀伤率均10％的浓度作为该药物的无毒剂 量。以维拉帕米(VRP)为阳性对照，采用无毒剂量的SCA及 表达水平，以及处理前后两细胞内ADM的平均荧光强度。 结果：1 中文摘要 着浓度增加抑制率相应升高，由回归分析得出，当SCA的 终浓度0．1lgg／ml时，对两细胞生长无明显抑制作用，本实 (40．85_+0．40)ttg／m1 药性，其逆转倍数分别为1．51倍和9．52倍，两药物逆转程 度比较，SCA作用较弱，差异具有极显著性∽0．01)。2 mRNA， RT-PCR检测结果显示：K562／A02细胞高表达mdrl mRNA，两株细胞mdrlmRNA的表 K562细胞不表达mdrl mRNA的表达均随作 K562／AO，细胞24h、48h、72h，mdrl 用时间延长而逐渐降低，以72h表达最低，两药物比较无显 FCM检测结果显示：K562细胞膜表面 著性差异伊0．os)。3 P．gp蛋白表达量的FI值随作用时间延长而逐渐降低，72h 更显著，72h 蛋白的表达，其中SCA降低P—gp蛋白表达程度不及VRP， 到Bcl．2蛋白的表达，且在两株细胞中Bcl一2蛋白的表达无 低，72hBcl．2表达最低；同一时间点两药物比较，作用24h 中文摘要 用时问的延长，两药物降低Bcl．2蛋白表达能力无明显差别 Bcl．2表达量的FI值随作用时间延长而逐渐降低，72h表达 细胞Bcl．2蛋白的表达，两者比较无明显差异f尸0．05)。单独 用时间的延长而相应的增加，具有时间依赖性。其中SCA 增加细胞内ADM的能力低于VRP，两者比较差异具有极显 著性fP0．01)。 性。2无毒剂量的斑蝥酸钠对K562／A02细胞阿霉素耐药性 体外有一定的逆转作用，但较维拉帕米的逆转作用明显减 弱。3可能的逆转机制：①一定浓度的斑蝥酸钠可能通过在 肿瘤细胞多药耐药。②一定浓度的斑蝥酸钠可能通过抑制 P．gp药物泵的泵出功能，提高细胞内化疗药物的聚集，增加 耐药细胞内化疗药物的浓度，从而有效杀伤肿瘤细胞达到逆 转肿瘤细胞耐药。③一定浓度的斑蝥酸钠可能通过降低Bcl．2 的表达，解除对Bax＼Bak的抑制，可能也解除了对药物损伤 死亡信号的抑制，从而促进细胞凋亡来逆转肿瘤细胞耐药。 4本研究为临床应用提供了理论依据，为肿瘤多药耐药逆转 中文摘要 提供了新的选择。 英文摘要 of EffectsDisodiumCantharidinateonHuman CellsInVitro Multidrug-resistantK562／A02 andIts Mechanisms