新型发酵厂实习报告.ppt

5、先加4滴NaOH溶液、加2ml样品稀释液至乙比色管中；加4滴NaOH溶液至甲比色管中；放入冷水中冷却 6、吸取5ml比色管中反应液至已有少量蒸馏水的带玻璃塞的锥形瓶中；加入10ml 0.1%碘液； 7、加入15ml 0.1% NaOH溶液至带玻璃塞的锥形瓶中，盖好瓶盖，在瓶口喷洒少许蒸馏水，黑暗反应15min; 8、加2mlH2SO4溶液至带玻璃塞的锥形瓶中； 9、用0.5%硫代硫酸钠溶液滴定至无色，记录所用硫代硫酸钠的量。 高、中温α-淀粉酶酶活力的测定 原理：a-淀粉酶能将淀粉分子链中的a-１，４葡萄糖苷键随机切断成长短不一的短链糊精，少量麦芽糖和葡萄糖，而使淀粉对碘呈蓝色的特异反应消失而变成红棕色，其颜色消失的速度与酶活力有关，故可在标准条件下通过测定反应时间而算出酶活力。 目测法结果 高、中温α-淀粉酶酶活力的测定的步骤 目测法： 1、 酶制备液 酶浓度300—500u/mL； 2、吸取标准色溶液6mL于试管中，做比色标准 3、吸取20mL20%淀粉溶液和pH6.0缓冲液5mL置于试管中，在恒温水浴器中预热平衡5min， 4、加入酶制备液0.5mL立即记录时间，摇匀， 5、当反应接近2min时就开始不断用吸管取1mL反应液加至预先盛有稀碘液5mL的试管中， 6、当试管中反应液的颜色由紫变为红棕色与标准点相同时，即为反应终止， 高、中温α-淀粉酶酶活力的测定的步骤 比色法： 1、酶制备液 酶活力在4u/mL左右 2、吸取20mL20%淀粉溶液和pH6.0缓冲液5mL置于试管中，在恒温水浴器中预热平衡5min 3、加入酶制备液1mL立即记录时间，摇匀，准确反应5min 4、以0.1ml/L盐酸溶液0.5ml和稀碘液5ml的混合液作空白，于660nm波长下用10ml比色皿迅速测定吸光度根据吸光度查附表得出酶液的活力 动手测酶活 瞧，认真吧 看我们的 八、实习小结 （一）思想高度重视，积极主动多学习 （二）理论联系实践，生产实践促学习 （三）注重学习方法，勤思多问善总结 （四）认真体味生活，自信达观看世界 （五）吸取经验教训，不断求索谋发展 通气控制 溶氧是需氧发酵控制最重要的参数之一。由于氧在水、发酵液的溶解度都很小，因此，需要不断的通气和搅拌，才能满足不同发酵过程对氧的需求。溶氧的大小对菌体生长和产物的形成都会产生不同的影响。 津市新型发酵有限公司的供气量一般控制为一级种子罐80m3/L，二级罐为150m3/L，三级罐300m3/L ，四级发酵罐则根据罐体积而定。 供气流程： 高空采气 空气压缩 空气贮藏罐 冷却器 旋风分离器 （除油、水） 丝网分离器 （除灰尘） 加热器 总过滤器 （棉花、膜） 粗滤（孔径0.3-0.5um） 精滤（孔径0.1-0.3um） 入罐 高空采集 空气压缩机 空气贮 藏罐 冷却器 加热器 粗精空气过滤器 空气贮藏罐的作用 由于空气经过空气压缩机后，产生不稳定的气流波，利用空气贮藏罐可以使气流平稳。 冷却的目的 加热的目的 空气经过压缩，升温的70-80℃，在突然降温，水分凝集，再用旋风分离器去除。 气流经过丝网分离器后，经加热器升温到50左右，是空气的湿度降低，有助于过滤。 泡沫控制 泡沫是气体在液体中的粗分散体。属于气液非均相体系，在这个体系中，分散相是（气体），连续相（液体）。产生的原因有：（1）由外界引进的气流被机械地分散形成；（2）发酵过程中产生的气体聚结生成；①气液接触：搅拌液体时混入气体；气体从液体内部产生；②含助泡；③起泡速度高于破泡速。 泡沫对发酵的不利影响有：（1）降低发酵设备的利用率；（2）增加了菌群的非均一性；（3）增加了染菌的机会；（4）导致产物的损失。 一般采用化学消泡法即在发酵液中加如食用油使泡沫破碎 补料控制 下面以发酵罐为例来说明补 料控制的原理及目的 原理 刚灭菌的发酵液的DE 值110±10，当 发酵液的DE值降至10时开 始补料，由于补料速率低于消耗速率DE值 一直下降，最终使DE值保持在10-15左右。 目的 保持发酵正常快速进行，保持产酶速率 补料罐 六、糖化酶提取工艺 放 罐 絮凝 盐析 一滤 二滤 超滤 精滤 压滤 绞条 成品配制 旋风分离 沸腾干燥 筛选 粉碎 混粉 贮存 成品 液酶提取 固酶提取 循环浓缩 分为一、二级旋风分离 混液重 新压滤 粗粉进行粉碎 絮 凝 添加2﹪的粗硅藻土和H2SO4 清 夜 压滤 混液 混液 清夜 液酶的渣子进行盐析作为固酶的填料，用固酶压滤时的滤液（废水）进行盐析，因为滤液中含有Na2SO4 将二级压滤的滤液通入过滤罐中