生物化学教学资料 第一章蛋白质化学.pptVIP

蛋白质(protein)是由许多氨基酸(amino acids)通过肽键(peptide bond)相连形成的高分子含氮化合物。 第一节 蛋白质的分子组成 一、蛋白质的元素组成： 蛋白质元素组成的特点 由于体内的含氮物质以蛋白质为主 二、 蛋白质的基本组成单位氨基酸 自然界中的氨基酸有300多种。 构成天然蛋白质的氨基酸仅有20种。 人体氨基酸除甘氨酸外均属 L-氨基酸。 除脯氨酸外均为α-氨基酸。 营养学上对氨基酸的分类 等电点(isoelectric point, pI) 三、氨基酸在蛋白质分子中的连接方式 （二）生物活性肽 1. 谷胱甘肽(glutathione, GSH) 解毒作用：与毒物或药物结合，消除其毒性作用； 参与氧化还原反应：作为重要的还原剂，参与体内多种氧化还原反应； 保护巯基酶的活性：使巯基酶的活性基团-SH维持还原状态； 维持红细胞膜结构的稳定：消除氧化剂对红细胞膜结构的破坏作用。 多肽类激素种类较多，生理功能各异。 多肽类激素主要见于下丘脑及垂体分泌的激素，如催产素（9肽）、加压素（9肽）、促肾上腺皮质激素（39肽）、促甲状腺素释放激素（3肽）。 神经肽主要与神经信号转导作用相关，包括脑啡肽（5肽）、?-内啡肽（31肽）、强啡肽（17肽）等。 四、蛋白质的分类 小结 1、蛋白质元素组成：C、H、O、N（16%）、S 每克样品蛋白质含量（g）=每克样品含氮量（g）×6.25 2、组成蛋白质的20种氨基酸除Gly、Pro外，为L-α-氨基酸。 3、氨基酸分类：酸性、碱性、含硫、芳香族、含羟基的等。 4、理化性质：pI、280nm、茚三酮反应。 5、肽键、N末端、C-末端。 蛋白质的分子结构The Molecular Structure of Protein 二、蛋白质的二级结构(secondary structure) 蛋白质分子中某一段肽链，主链骨架原子（α-碳原子、羰基碳、氨基氮）的局部空间结构，不涉及氨基酸残基侧链的构象 。 ①每个肽单元以Cα为旋转点，依次折叠成锯齿状。 亚基 亚基是具有独立三级结构的多肽链，又称亚单位或单体、原聚体。 一级结构 第一个氧分子与Fe2+结合 蛋白质空间构象的改变引起其功能的变化。 协同效应 小结 1、蛋白质一级结构是空间结构及功能的基础。 2、变构效应、变构效应剂、协同效用。 3、蛋白质的pI、维持蛋白质胶体溶液稳定的因素、蛋白质的变性定义本质及应用、蛋白质复性。 4、蛋白质在280nm处有最大吸收峰。 五、蛋白质的分离纯化 （三）蛋白质构象改变与疾病 蛋白质构象疾病：蛋白质的折叠错误→构象改变 →影响功能→导致疾病。 发病机理：蛋白质错误折叠相互聚集，形成抗蛋白 水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性。 包括：人纹状体脊髓变性病、老年痴呆症、 亨停顿舞蹈病、疯牛病等。 疯牛病中的蛋白质构象改变 疯牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)引起的一组人和动物神经退行性病变。 PrPc α-螺旋 PrPsc β-折叠 正常 疯牛病 第四节 蛋白质的理化性质与分离纯化技术 一、蛋白质具有两性电离的性质 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 蛋白质的等电点( isoelectric point, pI) 体液中蛋白质的存在形式？？ 阳离子pH＜pI 阴离子pH＞pI 兼性离子pH=pI COO- P H2N COO- P H3N+ COOH P H3N+ +OH- +H+ +OH- +H+ 二、蛋白质具有胶体性质 蛋白质属于生物大分子之一，分子量可自1万至100万之巨，其分子的直径可达1～100nm，为胶粒范围之内。 表面电荷 水化膜 蛋白质胶体稳定的因素: 三、蛋白质的变性与复性 在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。 蛋白质的变性(denaturation) 生物活性丧失 粘度增加 结晶能力丧失 溶解度降低，易于沉淀 易被蛋白酶水解 变性造成蛋白质的理化性质改变： 造成变性的因素: 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等 。 变性的本质: ——破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。 应用举例: 临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。 若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性(renat