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ING4 和HIF 1 在人脑不同级别星形细胞瘤中表达的研究的论文.doc
ING4 和HIF 1 在人脑不同级别星形细胞瘤中表达的研究的论文
作者:赵树鹏 牛光明 陶胜忠 张鹏远 宋乐 尹先印 苏芳忠
【摘要】 目的 研究ing4及hif1α在星形细胞瘤中的表达,探讨它们在星形细胞瘤发生和发展中的作用。方法 采用免疫组化法检测45例星形细胞瘤标本及11例正常脑组织中ing4和hif1α的表达。结果 ing4在正常脑组织和星形细胞瘤中的阳性表达率分别为100%、42.4%;ⅰ~ⅱ级和ⅲ~ⅳ级星形细胞瘤中的阳性表达率分别为58.3%、23.8%,差异均有统计学意义(plt;0.05)。hif1α在正常脑组织和星形细胞瘤中的阳性表达率分别为0、71.1%;在ⅰ~ⅱ级和ⅲ~ⅳ级星形细胞瘤中的阳性表达率分别为54.2%、90.5%,差异均有统计学意义(plt;0.05)。结论 ing4和hif1α基因的表达与星形细胞瘤分级有密切关系,在其发生和发展过程中起重要作用。
【关键词】 ing4;hif1α;星形细胞瘤;免疫组化
【abstract】 objective to research the expressions of ing4 and hif1α in astrocytoma, and explore their roles in genesis and development of astrocytoma. methods immunohistochemistry a and 11 cases of normal brain tissues . results the positive rates of the expression of ing4 in normal brain tissue and astrocytoma a al brain tissue and astrocytoma a a grade, ay play an important role in genesis and development of astrocytoma.
【key a; immunohistochemistry
ing4基因是2003年发现的一种强的候选抑癌基因[1],它通过抑制肿瘤血管增生、调控细胞增殖和凋亡及细胞的接触抑制等抑制肿瘤细胞的生长。.缺氧诱导因子1α(hif1α)是一种重要的转录因子,能促进肿瘤的血管生成,对肿瘤迅速增长起着重要的作用。本实验通过对45例星形细胞瘤标本中ing4和hif1α蛋白检测,研究二者在星形细胞瘤发生和发展过程中的作用,为进一步揭示肿瘤的发病机制、诊断及治疗提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 一般资料 45例人脑星形细胞瘤均取自郑州大学第二附属医院神经外科200901~200907手术切除标本。男25例,女20例,年龄2~77岁,平均(41.8±18.3)岁。所有病例均为原发病例,术前未经放化疗。标本切除后中性福尔马林液固定保存,进行脱水、透明、浸蜡、包埋,蜡块连续切片,厚约4 μm,he染色后观察。按照2000年组织切片常规脱蜡,按sp盒说明进行。以pbs代替一抗作为阴性对照,兔抗人ing4多克隆抗体和兔抗人hif1α单克隆抗体购自美国santa cruz公司,sp试剂盒购自北京中杉金桥生物技术公司,所用两种兔抗人抗体的终浓度为1∶100。
1.3 染色结果判定 ing4阳性表达以细胞核和或胞浆内出现棕黄色颗粒为准, hif1α表达于胞核或胞质,但主要是核表达,呈棕黄色。参考hiroshi等[3]提到的方法,随机选10个高倍视野,依照细胞着色密度和着色强度半定量评分:(1)染色细胞百分比:未见染色为0分,≤25%细胞染色为1分,25%~50%细胞染色为2分,gt;50%细胞染色为3分;(2)依阳性细胞染色强度:未见染色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分,上述两者之和的总得分来判定结果,gt;2分定义为阳性表达(+),≤2分定义为阴性表达(-)。
1.4 统计学处理 采用spss 13.0统计软件包进行统计学处理,统计方法采用χ2检验。检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 ing4的染色结果 ing4阳性染色细胞可见细胞核和(或)胞浆内出现棕黄色或褐黄色均质颗粒,主要位于胞核,也可见于脑胶质细胞、脑锥体细胞、血管内皮细胞及间质纤维组织。正常脑组织均见表达,明显高于星形细胞瘤中的表达,且在ⅰ~ⅱ级组中阳性表达率高于ⅲ~ⅳ级组,差异均有统计学意义。见表1。表1 ing4蛋白在正常脑组织和星形细胞瘤中的表达注:脑组织与星形细胞瘤比较,χ2=11.864,plt;0.05;ⅰ~ⅱ级与ⅲ~ⅳ级比较,χ2=5.472,plt;0.05
2.2 hif1α的染色结果 hi
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