HHV6和HHV7感染与类风湿性关节炎的相关性论文.docVIP

　　HHV6和HHV7感染与类风湿性关节炎的相关性论文 王笑峰 孙迎娟 罗兵 李慧 王云 【关键词】 HHV6 ［摘要］ 目的 探讨人疱疹病毒6型(HHV6)和7型（HHV7）感染在类风湿性关节炎（RA）病因学中作用。方法 用巢式PCR技术，检测62例类风湿性关节炎病人和138例健康献血员外周血单个核细胞（PBMCs）和血浆中HHV6和HHV7 DNA。结果 类风湿性关节炎病人组PBMCs中HHV6和HHV7 DNA阳性率与正常对照组比较均无显著性差异（P 0.05）；部分类风湿性关节炎病人血浆中可检出HHV6和HHV7 DNA，而对照组血浆中则为阴性。结论 类风湿性关节炎病人中可能存在HHV6或HHV7的活动性感染，与类风湿性关节炎的发生发展有一定关系。 ［关键词］ 关节炎，类风湿; 疱疹病毒6型，人;疱疹病毒7型，人;巢式聚合酶链反应 RELATIONSHIP BETATOID ARTHRITISicrobiology, Qingdao University Medical College, Qingdao 266021, China) ［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the role of human herpesvirus 6 and 7 （HHV6, HHV7） infection in the etiology of rheumatoid arthritis （RA）.MethodsHHV6 and HHV7 DNA from the plasma and peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) atched healthy adult donors. ResultsThe differences of positive rates of HHV6 DNA and HHV7 DNA in PBMCs of the patients a of some patients but negative in the plasma of the controls.ConclusionHHV6 and HHV7 DNA are present in the plasma of some RA patients, ay be related to the pathogenesis of RA. ［KEY Cs中HHV6和HHV7 DNA的检测采用巢式PCR方法。PCR引物设计及巢式PCR反应条件均参照文献 ［1］，引物由上海生工生物技术服务有限公司合成。引物序列见表1。同时设立阳性对照和阴性对照，HHV6阳性对照为HHV6标 表1 巢式PCR引物序列（略） 取PCR产物10 μL，20 g/L琼脂糖凝胶（含0.5 mg/L EtBr）中电泳，80 V、1 h，紫外线透射仪下观察结果。HHV6外侧PCR扩增产物为287 bp，内侧PCR扩增产物为163 bp；HHV7外侧PCR扩增产物为186 bp，内侧PCR扩增产物为124 bp。 1.2.4 限制性酶切分析 取HHV6、HHV7内侧PCR阳性扩增产物分别用HindⅢ和 EcoRⅠ进行限制性内切酶分析。酶切产物于120 g/L聚丙烯酰胺凝胶中电泳，80V、90 min，凝胶用EtBr（0.5 mg/L）染色20 min。紫外线透射仪下观察结果。 1.3 统计学分析 采用SPSS四格表卡方检验。 2 结 果 2.1 HHV6 DNA检测RA病人PBMCs中有34例HHV6 DNA阳性，阳性率为54.84%；对照组PBMCs中有73例HHV6 DNA阳性，阳性率为52.90%（见图1）。两组 HHV6 DNA阳性检出率差异无显著意义（χ2=0.002，P 0.05）。34例PBMCs HHV6阳性RA病人血浆中23例检测出HHV6 DNA ，阳性率为37.10%，而对照组血浆中未发现HHV6 DNA阳性者。 2.2 HHV7 DNA检测 RA病人PBMCs中有38例HHV7 DNA阳性，阳性率为61.29%；对照组PBMCs中有80例HHV6 DNA阳性，阳性率为57.97%（见图1）。两组HHV7 DNA阳性检出率差异无显著意义 图1 部分标本PBMCs中HHV6、HHV7 DNA 内侧 PCR检测结果 2.3 PCR产物的限制性酶切分析 HHV6内侧PCR阳性扩增产物（163 bp），经限制性核酸内切酶Hind Ⅲ酶切后可观察到两种情况，HHV6A酶切产物为 66 bp和97 bp 两条带，而HHV6B不被消化仍为163 bp的内侧PCR扩增条带。RA病人组34例HHV6阳性者中，有30例病人为HHV6B型（88.24%），有4例为HHV6A型（11.76