电堆积大体积进样-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法测定胡黄连中的4种有机酸.pdfVIP

第39卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第2期 2011年2月 ChineseJournalof 208～212 AnalyticalChemistry 电堆积大体积进样一在线扫集一胶束毛细管电动色谱法 测定胡黄连中的4种有机酸 李利军’ 胡大春1 郝学超1 高文燕2 吴启涛1 赖映标1 李彦青1 1(广西工学院生物与化学工程系，柳州545006)：(广西大学化学化工学院，南宁530004) 摘要建立了以电堆积大体积进样一在线扫集一胶柬毛细管电动色谱法测定胡黄连中的异阿魏酸、肉桂酸、 阿魏酸和香草酸的新方法。考察了pH值、四硼酸钠浓度、SDS浓度、电压、有机溶剂和进样时间对分离效果 的影响。以40mmol／L四硼酸钠一80 mmol／L十二烷基磺酸钠(SDS)为缓冲液(含10％(∥y)甲醇，pH9．4)。在 进样电压一10kV，分离电压20kV，检测波长214nm，环境温度25℃的条件下，达到最佳的分离效果。异阿魏 酸、肉桂酸、阿魏酸和香草酸的线性范围分别为16～543 pg／L，16～518肛g几，18～589pg／L和14～161 p班；回 的检出限分别为618，148，368和76 ng／L。 关键词 胶束电动毛细管色谱；电堆积；大体积进样；扫集法；异阿魏酸；肉桂酸；阿魏酸；香草酸 1 引 言 毛细管电泳技术具有分离速度快、分离效率高、样品及试剂消耗少和毛细管柱寿命长、易清洗等优 点，近年来在中药有效成分分析中得到广泛应用“二】。由于一般的毛细管内径较小，进样体积小、检测光 程短，从而使得毛细管电泳的检测灵敏度较低p】。在线富集技术操作简便，是解决该问题的较好方法。 常用的在线富集技术有等速电泳【4】、样品堆积技术网和扫集技术”9】。其中样品堆积技术常与等速 电泳和扫集技术联用，可提高灵敏度，常用的方法有场放大及离子选择性耗尽进样与扫集技术的联用。 本实验采用样品堆积和扫集联用技术，与场放大和离子选择性耗尽进样方法相比，本方法进样时间更 长，进样体积更大，检测灵敏度更高。由于本实验整管充入水，与场放大进一段水柱和离子选择性耗尽 进样进一段高导溶液相比，操作步骤减少，考察的条件减少，操作更简单快捷。实验结果表明，本方法富 集效果明显，有效地提高了灵敏度。与简单的电堆积法㈣相比，灵敏度提高了3个数量级；与在线扫集一 胶束毛细管电动色谱法相比，灵敏度提高了2～3个数量级，且重复性较好。 有机酸含量常被作为中草药质量评价指标。目前，对胡黄连中有机酸的分离及检测的方法主要有 高效液相色谱法…1和高效毛细管电泳法【lo】。采用本实验的方法对胡黄连中4种有机酸进行分离和检 测，结果表明，本方法可在普通的商品毛细管电泳仪上操作。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 ACS2000型高效毛细管电泳仪(北京彩陆科学仪器有限公司)，未涂层毛细管(西50um，总长60cm， 有效长度47 之信仪器有限公司)；分析天平(奥豪斯(上海)有限公司)，EF20 pH计(梅特勒一托利多仪器(上海)有限 公司)。 阿魏酸、异阿魏酸、肉桂酸和香草酸的对照品(中国药品生物制品检定所)；胡黄连(购于广西柳州桂 中大药房)；四硼酸钠(汕头市西陇化工厂)；甲醇(天津市四友生物医学技术有限公司)，十二烷基磺酸钠 (SDS，汕头市光华化学厂)，以上试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。 2010-07-04收稿；2010-09。16接受 本文系广西自然科学基金(No．0832062)资助项目 ’E-mail：lilijun0562@sina．tom 第2期 李利军等：电堆积大体积进样一在线扫集一胶束毛细管电动色谱法测定胡黄连中的4种有机酸