运用PCR技术分析上消化道疾病与幽门螺杆菌之间的关系.pdfVIP

‘ 146‘ 安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2008 Feb；12(2) 运用PCR技术分析上消化道疾病与幽门螺杆菌之问的关系 叶章强 (中铁四局中心医院检验科，安徽合肥 230023) 摘要：目的 运用PCR技术分析上消化道疾病与幽门螺杆菌 化乙锭染色在紫外灯下观察结果 ]。 感染之间的关系。方法 对146例胃部疾病的患者采用PCR 1．3 仪器 美国ERICOMP公司TCX20型扩增仪。 的方法检测胃黏膜中的幽门螺杆菌DNA。结果 检测结果 1．4 统计方法 采用spssl2．0统计软件进行数据分析。 发现慢性萎缩性胃炎、慢性浅表性胃炎、胃溃疡和胃癌患者的 2 结果 黏膜螺杆菌DNA扩增阳性率分别为68．8％、63．8％ 、61．1％ 2．1 Hp DNA扩增琼脂糖电泳图谱 经2．0％琼脂糖凝胶 和62．5％。结论 本研究显示幽门螺杆菌感染是上消化道 电泳后在紫外灯下在695 bp处有黄色条带者为HP阳性。 疾病发生发展中的重要致病因素。 关键词：幽门螺杆菌；黏膜；PCR；胃部疾病 近年来随着人们在动物的胃部分离出幽门螺杆菌(Helico— bacter pylori，简称Hp)以来 ，人们经过大量的流行病学调查 发现rio是全球流行性的致病菌 ，与许多胃部疾病有关 j。 图1 幽门螺杆菌PCR琼脂糖电泳图谱 Hp感染引起胃黏膜炎症反应，在胃癌前病变发生中起着重要 注：1—4：检测标本；5．阴性对照；6．阳性对照；7．100 bp DNA Marker 作用 。我国也是Hp高感染国家，在普通人群中的感染率在 2．2 不同胃部疾病患者HP DNA阳性结果比较 我们检测 50％～80％ ，为进一步研究胃部一些疾病与Hp的关系，我们 了146例胃部疾病的患者，经胃镜和临床病理确诊，其中有慢 采用PCR的方法检测了不同胃部疾病患者胃黏膜中的幽门螺 性萎缩性胃炎32例，慢性浅表性胃炎80例，胃溃疡18例，胃 杆菌DNA，探讨Hp与胃部疾病形成之间可能存在的关系，为 癌16例，结果发现黏膜的螺杆菌DNA扩增阳性率分别为68． 临床明确诊断对症治疗提供实验室的检测手段。 8％、63．8％ 、61．1％和62．5％ (表 1)。 1 资料与方法 表1 胃部疾病HP DNA及银染色阳性结果( =146) 1．1 临床资料 20O6年2～12月收集在中铁四局医院因上消 倒特 鐾鱼堕壁 垦堕 堡 鱼 化道症状接受胃镜诊疗的门诊和住院患者，选取146例作为实 … Hp DNA阳性阳性率l／％ HP阳性 阳性璋_／％ 验组，其中慢性萎缩性胃炎32例，慢性浅表性胃炎80例，胃溃 疡18例，经病理确诊的胃癌患者16例。其中男性102例，女 性44例，平均年龄47．5岁。全部病例均在距幽门口2～5 cm 内胃小弯侧同一部位连续取2块黏膜组织，分别作聚合酶链式 反应(PCR)检测及病理Warthin—Starry银染色检查。 1．2 方法 3 讨论 1．2．1 标本处理 取胃镜活检胃部黏膜组织一块，剪碎放入 幽门螺杆菌菌体主要定植于人和动物的胃黏膜黏液层， 玻璃研磨器中加入0．2 ml DNA裂解缓冲液(100 mmo