去势小鼠自体冷冻卵巢移植后海马神经元超微结构变化.pdfVIP

宁夏医学院学报 第3o卷 1期 · 4 · Joumal of Ningxia Medical Colk~je 2008年2月 文章编号：1005—8486(2008)01—0004—03 · 论著· 去势小鼠自体冷冻卵巢移植后海马神经元超微结构变化 赵承军 ， 孔 斌 ， 张 炎 ， 崔 岫 ， 朱万平 ， 黑常春 (1．宁夏医学院基础学院组织学与胚胎学教研室，银J 7．5(／)04；2．宁夏医学院中心实验室，银川 7X10(O) 摘要：目的 观察去势小鼠卵巢移植对大脑海马神经元超微结构变化的影响，探讨卵巢分泌激素对中枢神经 系统的作用。方法 将去势雌性BALB／C小鼠随机分为移植组、去势对照组和空白对照组，每组各 10只。移 植组于去势后2周行自体冷冻卵巢解冻移植，移植组于移植2周后、去势对照组和空白对照组于4周后取大 脑海马部位观察神经元行形态学变化。结果 移植组小鼠大脑神经元超微结构与正常对照组相同，形态及结 构完整正常；神经元突触密度较去势对照组增高(P0．01)，而去势对照组小鼠神经元结构欠完整，突触密度 也降低。结论 去势小鼠行卵巢移植可增加海马神经元突触数，保护神经元的形态结构和功能。 关键词：去势；卵巢移植；海马神经元；小鼠 中图分类号：R713．6 文献标识码：A 随着社会的进步和人们对身心健康的日渐关注，因卵 后每只小鼠腹腔注射3～4万IU青霉素以防感染。普通饲 巢因素而影响到女性健康的问题已日益受到人们的重 料饲养、进水。术后第2周开始，卵巢移植驵进行自体冷冻 视L1 J，卵巢不仅是维持女性生殖内分泌活动的重要器官，也 卵巢移植；空白对照组和去势对照组腹腔注射生理盐水。 与女性正常的生理功能密切相关。各种原因所致的卵巢功 各组均观察动情周期情况。 能突然减退或丧失，将给患者带来一系列生理功能紊乱，甚 1．2．1卵巢组织的冻存 将小鼠卵巢皮质组织块(2 InlTl x 至出现认知功能低下、记忆力减退、忧虑等神经症状，为改 3 InlTlx 3mm)在2．0mL的无蔗糖A1冷冻保护液中4℃下渗 善这些症状，临床对绝经后妇女应用雌激素替代疗法，但这 透平衡20min后，再放人对应的含0．1M蔗糖的A2冷冻保 种疗法存在一定的副作用【2l。卵巢移植在解决女性生育力 护液中，此时开始装管，将小鼠卵巢皮质组织块移人A2冷 方面受到了妇产科学界的关注，是否可以通过卵巢移植为 冻管内的冷冻液中，4℃条件下继续渗透平衡，20 min后开 卵巢功能低下患者提供均衡的生殖激素，提高患者的生活 始冷平衡，冷平衡在自制的液氮蒸汽浴槽中进行，将装有小 质量是我们关注的课题，本研究通过动物实验观察卵巢移 鼠卵巢皮质组织块的冷冻管水平放置在该液氮浴槽中， 植后海马神经元形态学的变化，探讨卵巢激素对中枢神经 5min后将麦管投入一196％的液氮罐中即完成了快速冷冻 系统的影响。 的全过程。 1 材料与方法 1．2．2 卵巢组织的解冻 卵巢组织冻存14d后，将麦管从 1．1 实验材料 清洁级BALB／C小鼠，体重22～25g，由宁 液氮中取出后，迅速置于37％水浴中，随着管内液体的融 夏医学院实验动物中心提供。戊巴比妥钠：中国医药(集 化，气泡上升冷冻液与解冻液自动混合，可见卵巢组织从冷 团)上海化学试剂公司提供。H一6130电子显微镜：日本日 冻液的一端缓缓降至含解冻液的另一端，剪开麦管两头，组 立产品。 织块连同液体一起流人表面皿中，充分晃动，加入解冻液， 1．2 实验方法及步骤 小鼠随机分为卵巢移植组、去势对 在37％温箱放置30min后将组织块移人含20％sJ~牛血清的 照组和空白对照组，每组10只；当小鼠处于动情间期时，用 DMEM中，37％条件下，充分漂洗，中间换液一次，置于含 0．5％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠(0．1mL／lOg)，常规消 5％CO2、37℃培养箱内30min后准备移植。 毒后，在肋脊角处切开皮