黑素皮质激素受体-1结构及功能.docVIP

黑素皮质激素受体-1结构及功能黑素皮质激素受体属于G蛋白偶联受体（GPCR）超家族中的A类，现共发现有五种黑素皮质激素受体（MC1R～MC5R）。黑素皮质激素受体-1（MC1R）在人类正常黑色素细胞和黑色素瘤细胞中均有表达，在肤色和发色形成中起主要作用。此外，MC1R在培养的正常角质形成细胞、毛细血管内皮细胞中也有表达[1-2]。 1MC1R的结构 人类MC1R基因分别由Chhajlani和Mountjoy两个研究组在1992年克隆出来。MC1R由317氨基酸组成，含有7个跨膜区，N端位于胞外，C端在胞内。 1.1 胞外N端结构特征：多数膜蛋白N末端都含有协同新生蛋白质定位到内质网的信号肽，但是移除MC1R的N末端头部27氨基酸对其定位或在COS细胞中的表达没有影响[1] 。N端氨基酸残基Ser6、Glu269和Thr272的突变会导致与激动剂结合力明显降低，这表明膜外环形结构含有与重要配体结合的位点。MC1R的N端有15NSTP18和29NQTG32两个糖基化氨基酸残基序列[2-3]，N端糖基化有何作用目前还不太明确。靠近N末端和第一个跨膜区含有存在于所有MCR中的Pro残基，该残基突变成Gly或Ala均会使MC1R活性降低[4-5]。 1.2 膜外环区域：膜外环区域的结构和MCR受体的功能完整性有很大关系。MC1R的膜外环都很小，同时所有MCR都有第二个膜外环较短的特点[6-7]。第三个膜外环结构相对较为保守，富含Pro和Cys。Chhajlani [8]等与1996年发现第三个跨膜环上氨基酸残基Glu269和Thr272突变成Ala会导致受体和激动剂结合力下降。氨基酸残基Cys273突变成Gly会使受体功能丧失[6]。 1.3 胞内C端结构特点：C端长度为19个氨基酸，其中6个在现有5种MCR中是相同的。MCR1同其他G蛋白偶联受体类似，胞内部分含有G蛋白结合域和信号传递相关功能区域。这些功能域所包含的Ser和Thr残基的磷酸化会使受体失敏感，具有调节细胞摄取的功能。Sánchez-Más等[9]报道C端最后五个氨基酸缺失将会导致受体功能障碍。这些研究提示MC1R功能与C端的完整性有关。 2MC1R和配体的作用 2.1 阿片-促黑素细胞皮质素原（POMC）是促黑素细胞激素家族前体，这个家族包括α、β、γ-促黑色素细胞激素（MSH）及促肾上腺皮质激素（ACTH）等。人体正常黑色素细胞和角质形成细胞也能够生成POMC中的α-MSH和ACTH[10-11]。MC1R激动剂包括α-MSH和ACTH等，它们与受体结合后通过活化腺苷酸环化酶，提高cAMP水平，从而增加细胞内真黑素的含量[12-13]。此种作用能够被人小眼畸形蛋白调控[14]。人类MC1R和α-MSH亲和力最高，和ACTH也有也相近的亲和力，β-MSH相对较小，γ-MSH亲和力最小[15]。这些研究提示γ-MSH对色素产生没有明显促进作用。α-MSH同时还具有能促进培养的黑色素细胞增殖的能力[16]。因α-MSH或ACTH与MC1R结合后能使MC1R的mRNA表达量增加，从而不出现G蛋白偶联受体长期与激动剂作用而引起的脱敏现象，同时还能够持续进行有丝分裂并形成黑色素 [17]。肤色是由表皮中黑素的产生和分布决定的。表皮黑素单位是一种产生和转运黑素的功能单位，它是由一个黑素细胞和邻近的大约36个角质形成细胞组成的特殊结构，黑素体转运至邻近的角质形成细胞中，分布于角质形成细胞核周，可使表皮和真皮免受紫外线损害。关于黑素生成的过程目前研究较多。在黑素细胞内，含有黑素的黑素体从最初的核周细胞质转移至突起是由微管蛋白以及肌动蛋白组成的运动蛋白介导的，黑素体被角质形成细胞摄取，并分散到细胞浆中，从而决定皮肤肤色。研究发现，细胞骨架成分在促进黑素小体的转移中发挥了重要作用。α-MSH和MC1R结合后能够增加黑素小体生成和黑色素细胞树突生长，并能够诱导细胞支架肌动蛋白丝重构，促进黑素小体传递[18]。 2.2 Agouti信号蛋白（ASP）是MC1R另外一种类型配基。Agouti基因编码Agouti信号蛋白，人、狐狸、猪、绵羊等的Agouti基因相继被发现[19-20]。不同物种的Agouti基因及Agouti信号蛋白有较高的同源性。人的Agouti基因位于染色体20ql1.2区，编码ASP。ASP由132个氨基酸构成。人与鼠的Agouti基因同源性可高达85％,Agouti信号蛋白同源性更高达89％[19]。ASP能够竞争抑制α-MSH与受体的结合，从而起到MC1R抑制剂作用。Suzuki等[21]在1997年发现ASP具有完全抑制α-MSH促进黑色素细胞有丝分裂和黑色素生成的作用，并且明显抑制了酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)