TAT-血红素氧合酶-1融合蛋白对大鼠原位肝移植氧化应激和炎症反应的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………l oOooQooogoo…………………OOOOOOO06OQ 英文摘要………………O O…………4 研究论文吖小血红素氧合酶．1融合蛋白对大鼠原位肝移植氧化应激 及炎症反应的影响 前言……………”””O刚舌…”一”“…”””。 OOOMO……………”．．“”．．．．“”一”一“……”·7………“”””““”“““”一”一““”””。／ 00 600 000 00 0…………“………………·8 材料与方法…………………0 OOOBOOOOOOO……···……·…………………··…·····……·…···17 结果···O OOOO0…………………………………………………………18 附图…O 附表…………………………………………………………………33 讨论···················…··……··································…··i…··35 结论·………·······…··……···…··…···……·…·……·一····一·……38 参考文献……………………………………………………………39 综述TAT蛋白转导肽的研究进展……………………………………43 致谢·······…·………···…······…········…··…··一…······…··…”··…··52 ooooooo·……………………………………………………53 个人简历……o ’ 中文摘要 乳婚血红素氧合酶．1融合蛋白对大鼠原位肝移植 氧化应激及炎症反应的影响 摘 要 目的：随着肝脏外科技术的进步和移植免疫学的迅猛发展，肝脏移植 病人和移植物的生存率明显提高，肝移植可作为终末期肝病有效的治疗方 法。但是肝移植后影响移植物存活的因素很多，包括缺血再灌注损伤、排 斥反应。目前由于供肝资源紧缺，如何有效保护供肝，减少移植肝脏无功 能的发生率更加受到了人们的重视。HO．1蛋白是机体血红素分解代谢的 限速酶，分解后产生一氧化碳(CO)、胆绿素及Fe2+，具有抗炎症、抗氧化、 抗凋亡、减少血管损伤、下调血管内皮细胞细胞间黏附分子表达、增加移 植器官的血流灌注等作用，已引起国内外学者的广泛关注。蛋白转导结构 transduction 域(protein 多肽，蛋白质或多肽与PTDs相连后可进入细胞内发挥生物功能。HIV．1 反式激活蛋白TAT是目前研究较多的PTDs之一。有研究证实，仉盯与HO—l 胞活力。本研究前期实验证实TAT-HO．1蛋白可以成功转导进入离体培养 的肝细胞，并且可在缺血／再灌注后、冷保存期间成功转导进入大鼠肝脏， 减轻肝脏缺血／再灌注损伤、冷保存导致的细胞凋亡、炎症和氧化应激反 应等。本研究在前期研究基础上，对TAT．HO．1在大鼠原位肝移植期间是 否能进入肝组织细胞以及是否有效对肝脏提供抗氧化和抗炎症的保护作 用这一问题进行进一步探讨。 BL．2 化E．coli 公司，德国)纯化，用Westernblot法对TAT．HO．1进行定性分析，用化学 (浓度1mg／m1)后进行动物实验。 健康雄性成年SD大鼠，体重250～2809，随机分为供体组和受体组。参 中文摘要 照Kamada等的双套管方法建立大鼠原位肝移植模型。移植完成后将受体 背静脉给予TAT．HO．1蛋白10 ml／kg。对照组(C组)，于移植完毕时经阴 茎背静脉给予生理盐水10 ml／kg；两组分别于分离肝脏血管