土壤中产碱性蛋白酶菌株的筛选及产酶条件的研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sci．2011，39(31)：19112—19114 责任编辑 杨莹莹 责任校对 况玲玲 土壤 中产碱性蛋 白酶菌株的筛选及产酶条件的研究 周宜君，何文婕，符沙欧，田君端，马亭亭，戴景峰 (中央民族大学生命与环境科学学院，北京1o0o81) 摘要 [目的]从土壤 中筛选产碱性蛋白酶菌株，并优化产酶条件。[方法]采用平板分离方法从土壤样品中分离出8株产碱性蛋 白酶 茵株，采用滤纸片法和 F0lin一酚法测定8个菌株的产酶能力。将具有较强产酶能力的菌株作为目的菌株，研究该菌株产酶能力的影响因 素，并采用正交试验法优化产酶条件。[结果]经过初筛和复筛，从土壤中得到一个碱性蛋 白酶高产茵株(5号)，作为 目的菌株，其产酶 能力为6．0oU／ml，为地衣芽孢杆菌的134．1％，该菌株为革兰氏阳性芽孢梭茵。正交试验表明，在pH为 11的初始发酵培养基中添加 0．3％蔗糖和0．8％蛋 白胨，并以10个／ml的接种量接种，目的菌株可得到较好的产酶效果，且蛋 白胨对该菌株产酶能力具有显著影响。 [结论]该研究为产碱性蛋白酶茵株的筛选提供 了理论参考。 关键词 土壤；筛选 ；菌株；碱性蛋白酶 中图分类号 X131．3 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2011)31—19112—03 SelectionofStrainsProducingAlkalineProteasefrom SoilandStudyontheConditionsforEnzymeProd uction ZHOUYi-junetal (CollegeofLifeandEnvironmentalScience，MinzuUniversityofChina，Beijing100081) Abstract 10bieetive]Theaimwastoselectstrainsproducingalkalineproteasefromsoilandstudytheconditionsforenzymeproduction． [Mehtod]Eightstrainsproducingalkalineproteasewereisolatedfromsoilthroughplateisolation，andtheirabilityofenzymeproductionwas measuredbyfiherpaperandFolin—phenolmehtod．Thestrainwithstrongestabilityofenzymeproductionwasselectedasstudyobject，htenhte factorsinfluencingtheabilityofenzymeproductionwasstudied，finallyhteconditionsforenzymeproductionwasoptimizedthroughorthogonal test．1ResultlNo．5srtainwasselectedasstudyobjectduetoitsstrongabilityofenzymeproduction (6．OOU／m1)．whichaccountedofr 134．1％ ofthatofBacilluslichenfiormis．anditwasgram—positiveClostridium spores．Orthogonaltestshowedthattheoptimalconditionofr producingproteasewasanenvironmentwithpH=l1。O．3％ ofsucroseand0．8％ ofpeptoneinthefermentationmedium ．pulsinoculationa． mountof10efu／m1．Inaddition，peptonehadsignificantimpactonthelevelofenzymeproduction．[Conclusion]11hestudycouldprovide theoreticalreferencesofrhteselectionofstrainsproducingalkalineprotease． Keywords Soil：Selection；Strain；Alkalineprotease 碱性蛋白酶是在碱性范围内水解蛋白肽键的酶类，是一 Na2HPO40．2％，KH2PO40．015％，pH为 9．0，12