细菌性肺炎快速诊断基因芯片的初步构建.pdfVIP

， ， ， ， — １ ０４８ — Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ Ｊｕｌｙ ２０ １ ４ Ｖｏｌ １ ８ Ｎｏ．７ 文章编号： （ ） １ ００７ －４２８７ ２０ １ ４ ０７ －１ ０４８ －０５ 细菌性肺炎快速诊断基因芯片的初步构建 １ ２  ２ ２ ２ ２ 董进浪 ，李 华 ，汪 健 ，王小中 ，胡晓彦 ，曾林祥 　 　 （ 烟台市莱阳中心医院检验科，山东莱阳 ； 南昌大学第二附属医院，江西南昌 ） １ ． ２ ６ ５０００ ２ ． ３ ３０００６ 摘要：目的 根据细菌 １ ６Ｓ ｒＲＮＡ 基因特点设计常见病原菌的特异性探针，采用酶显色技术构建基因芯片，探讨 　 其临床应用的可能性。方法 选取肺炎链球菌、流感嗜血杆菌及铜绿假单胞菌等 种细菌性肺炎常见的病原菌的标 ８ 　 准菌株作为研究对象，并选择 份患者的痰液标本进行检测。在 基因保守区设计 反应的通用引物 １ ２ １ ６Ｓ ｒＲＮＡ ＰＣＲ 及革兰阳性菌、革兰阴性菌的通用探针，利用可变区的差异设计合成特异性探针，构建基因芯片。利用细菌 １ ６Ｓ ｒＲＮＡ 基因设计的 通用引物进行扩增，所有 种细菌均获得 的扩增产物。以地高辛标记特异性探针，构 ＰＣＲ ８ ３ ５０ ｂｐ 建完成可用于 种常见病原菌检测的基因芯片，结果 种标准菌株基因芯片检测均取得了预期效果，对 份痰标 ８ ８ １ ２ 　 本中常规培养阳性 份，其对应芯片检测结果均成阳性， 份常规培养阴性的标本中，芯片结果提示阳性的有 份，其 ７ ５ ３ 中 份为嗜肺军团菌， 份为使用抗生素后的患者标本。结论 设计合成的 通用引物对扩增细菌的 １ ２ ＰＣＲ １ ６Ｓ ｒＲＮＡ