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食品生物技术备课笔记
实验二 甜酒酿的制作及酒药中根霉的分离
实验目的:
1.通过甜酒酿的制作了解酿酒的基本原理。
2.掌握甜酒酿的制作技术。
3.学习从酒酿中分离纯化根霉的方法。
实验内容:
1. 甜酒酿的制作
2. 根霉的分离
实验仪器设备和材料:
材料:糯米、甜酒曲(安琪)、马铃薯、葡萄糖、琼脂、无菌水等
器材:高压灭菌锅、酒精灯、研钵、无菌移液管、无菌培养皿、接种环、烧杯、滴管等
玻璃仪器
实验要求:
1. 学习甜酒酿的制备过程;
2. 掌握甜酒酿制作过程的原理,掌握根霉的分离技术。
实验方法与步骤:
1 甜酒酿的制作
(1)选择原料
酿制甜酒酿的原料常用糯米,选择时要用品质好、米质新鲜的糯米。
(2)淘洗和浸泡
将米淘洗干净后浸泡过夜,使米粒充分吸水,以利蒸煮时米粒分散和熟透均匀。
(3)蒸煮米饭
将浸泡吸足水分的糯米捞起,放在蒸锅内搁架的纱布上隔水蒸煮,至米饭完全熟透时为止。
(4)米饭降温
将蒸熟的米饭从锅内取出,在室温下摊开冷却至 30℃左右接种。
(5)接入种曲
按干糯米重量换算接种量。市售 “甜酒药”每包能酿制 3kg 糯米;而沪产 “浓缩甜酒药”
每包可接 1.5~2kg 糯米。为使接种时种曲与米饭拌匀,可先将酒药块在研钵中捣碎,或再
拌入一定数量的炒熟面粉后再与大量米饭混匀。
(6)装坛发酵
接种拌匀后的米饭可装坛发酵,注意在坛子的中轴留一个散热孔道,所用的容器都应预先
洗净,并用开水浇淋浸泡过,以杀死大部分杂菌。
(7)保温发酵
温度可控制在 30℃左右,发酵初期可见米饭表面产生大量纵横交错的菌丝体,同时糯米饭
的粘度逐渐下降,糖化液渐渐溢出和增多。若发酵中米饭出现干燥,可在培养 18~24h 补
加一些凉开水。
(8)后熟发酵
酿制 48h 后的甜酒酿已初步成熟,但往往略带酸味。如在 8℃~10℃条件下将它放置 2~3d
或更长一段时间进行后发酵,则可去除酸味。
(9)质量评估
酿成的甜酒应是酒香浓郁、醪液充沛、清澈半透明和甜醇爽口的。
2 根霉的分离
(1)器材的包扎准备,再高压灭菌
(2)配制PDA
先洗净去皮,再称取 200g 马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸 20~30 分钟,能被玻璃棒
戳破即可),用八层纱布过滤,加热,再加 17-20g 琼脂,继续加热搅拌混匀,待琼脂溶解
完后,加入 10-20g 葡萄糖,搅拌均匀,稍冷却后再补足水分至 1000 毫升,分装试管或者
锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20 分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存
备用。
(3)平板划线进行根霉的分离
先将酒药曲在研钵中磨细,再将研细的酒药种曲在含玻璃珠的三角瓶中打散成孢子悬
浮液,然后以 10 倍系列稀释法稀释,取适当稀释度的孢子悬液涂布平板或划线,在 28℃
左右培养 2 天,选择分离效果好的根霉单菌落移接到新鲜斜面上,观察其生长情况及形态
特征。
(4)初步鉴定 肉眼观察与镜检
思考题:
1 甜酒酿的制作原理是什么?
2 接种时,为什么酒药里要加淀粉一起混匀?
3 试描述根霉的形态特征。
实验三 高锰酸钾法测定蛋壳中 CaO 的含量
一、前言:
二、实验目的
1.学习间接氧化还原测定 CaO 的含量。
2.巩固沉淀分离、过滤洗涤与滴定分析基本操作。
3.培养学生理论联系实际,独立进行实验的能力。
三、实验原理
鸡蛋壳的主要成分为 CaCO ,其次为 MgCO 、蛋白质、色素以及少量的
3 3
Fe 、Al 。利用蛋壳中的Ca2+与草酸盐形成难溶的草酸盐沉淀,将沉淀经过滤洗
涤分离后溶解,用高锰酸钾法测定C O2 含量,换算出 CaO 的含量,反应如下:
2 4
Ca2 C O CaC O ;
2 4 2 4
CaC O H SO CaSO H C O ;
2 4 2 4 4 2 2 4
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