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生物工程导论-发酵工程
第五章 微生物工程 吴坚平 浙江大学生物工程研究所 玉泉校区 教十-6201 E-mail: wjp@ TelO) 发酵工程 发酵工程的概念 发酵工程发展简史 常用的工业微生物 微生物选育 微生物的营养和生长 发酵生产流程和反应器 主要微生物发酵产品 发酵工程的概念 发酵工程的概念 微生物工程:包括发酵工程,以及微生物在环保、资源和能源利用、农业等领域的应用 研究发酵工程的目的: 以尽可能低的成本大规模培养细胞,并高效率的利用它们的代谢活动产出尽可能多的产品。 重要性:生物技术从实验室走向工业化上次的必由之路。 发酵工程发展简史 古代对生物代谢作用的利用 新石器时代 外高加索,葡萄酒生产 约公元前3000年 古埃及和美索不达米亚地区(今伊 拉克),啤酒 约公元前2600年 中国,龙山文化,酿酒 约公元前2400年 埃及壁画,面包和酿酒 约公元前1000年 中国,酱油酿造 状况:知其然而不知其所以然 龙山文化的陶制酒器 古埃及关于啤酒的壁画 发酵工程发展简史 17世纪-19世纪(微生物学和遗传学起步) 1664年 Robert Hooke, 霉菌的显微镜观察 1673年 Leeuwenkoek, 细菌的显微镜观察 1856年 Pasteur, 酵母导致酒精发酵 1857年 Pasteur, 生物来自生物 1864年 巴斯德灭菌法 19世纪末 Koch, 纯种分离和培养技术 霉菌的显微镜观察 细菌的显微镜观察 巴斯德画的酵母与乳杆菌 Koch与纯种分离和培养技术 发酵工程发展简史 丙酮-丁醇发酵和甘油发酵 1914年 英国Weizmann,丙酮-丁醇梭状芽孢杆菌 用途:丙酮可制造火药 首例大规模发酵 工业规模使用灭菌技术和纯培养技术 1918年 德国Neuberg, 甘油发酵 通过加入硫酸钠使甘油产量提高、副产物 乙醇产量下降 标志着生物工程的萌芽 发酵工程发展简史 青霉素的发现和开发 1928年 Fleming发现青霉素 1938年 Florey和Chain开始开发青霉素 老鼠试验—人体试验 1941年 青霉素的开发转移到美国 改变培养基—菌种的筛选—诱变育种 表面培养——液体深层发酵 team work 标志着生物细胞培养技术的成型 青霉的杀菌现象 表面培养—液体深层发酵 生物工程发展简史 现代发酵工程的发展 1972年 首次DNA体外重组成功 1973年 DNA重组子表达成功,基因工程诞生 1978年 首个基因工程产品——重组人胰岛素生产 成功,重组微生物的发酵成为发酵工程的 一个新兴研究领域 … 微生物育种技术 诱变育种:物理(紫外辐射、电离辐射) 化学 代谢工程:基于代谢流分析和基因重组技术 DNA重排和基因组重排育种 微生物的营养和生长 碳源:葡萄糖、蔗糖、糖蜜、乳清等 氮源:无机氮源:氨、硫酸铵、尿素、硝酸盐 有机氮源:黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆 氧元素和氢元素 无机盐 生长因子:维生素、氨基酸、有机碱等 发酵生产流程和反应器 原料的预处理 培养基的配制 发酵设备和培养基的灭菌 无菌空气的制备 菌种的制备和扩大培养 发酵 发酵产品的分离纯化 原料的预处理 “粗粮”:粉碎 酸水解,酶法水解 氮源的预水解 发酵培养基的配制和灭菌 液体培养基:营养要求、pH 纯种培养:灭菌 蒸汽灭菌:121℃,20-30min,然后冷却 必须注意控制营养成分不被破坏 发酵过程的操作方式 间歇发酵:也叫分批发酵或批式发酵 生长曲线:迟滞期、对数生长期 稳定期、死亡期 连续发酵:连续进料、连续出料 困难:染菌、菌种变异(更多用于研究) 流加发酵:介于上述二者之间,工业上常用 发酵产品的分离纯化 细胞破碎(胞内产物) 固液分离 浓缩 产物的初步分离 产物的提纯和精制 产物的最后加工和包装 生物反应器 搅拌罐 鼓泡塔 气升式反应器 流化床反应器和填充床反应器 发酵过程的检测和控制 参数测量和调节 过程的模型化和控制策略:动力学研究 抗生素概述 抗生素概述——抗生素的发展 抗生素概述 抗生素概述 抗生素的分类 抗生素的分类 抗生素的分类 抗生素的应用 抗生素的生产 抗生素生产的工艺过程 培养基的配制 培养基的发酵 抗生素的提取 抗生素的精制 青霉素分离纯化工艺 抗生素
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