雌二醇及有氧力竭运动影响大鼠海马体 pi3kakt通路的研究-effects of estradiol and aerobic exhaustive exercise on pi 3 kakt pathway in hippocampus of rats.docxVIP

南京体育学院硕士学位论文南京体育学院硕士学位论文目 录摘要ⅠABSTRACTIII1 前言12 研究对象与方法 32.1 研究对象32.2 研究方法42.3 放射免疫测定52.4 免疫印迹检测大鼠海马体中 GPR30、PI3K、Akt、Bcl-2 和 eNOS 的蛋白表达52.5 主要药品及试剂72.6 主要仪器82.7 数据分析83 研究结果83.1 大鼠血液指标83.2 大鼠蛋白指标114 分析与讨论154.1 大鼠游泳力竭模型的建立与评价 154.2 力竭运动及 E2 对大鼠性腺轴的影响 164.3 力竭运动及 E2 对大鼠 PI3K/Akt 通路的影响 174.4 大鼠性腺轴与海马体 PI3K/Akt 的联系 195 结论196 展望 19参考文献21综述25中英文对照32致谢33II摘 要目的：观察外源性注射雌二醇(17β-estradio,E2)及力竭运动影响大鼠海 马体的磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K，phospha--tidylinositol 3-kinase)/ 丝氨酸／ 苏氨酸蛋白激酶 Akt(v-Akt murine thymomaviral oncogene homolog）信号通 路中激素和蛋白的变化，综合分析力竭运动及 E2 对机体运动能力的影响， 为探索运动性中枢疲劳产生和恢复机制提供实验依据。方法：将 48 只 SD 雄性大鼠随机分为安静对照组（A，n=12），力竭运 动组（B，n=12），安静雌二醇组（C，n=12）和力竭雌二醇组（D，n=12）。 C、D 两组在力竭运动前 1 小时注射 E2（4mg/kg），B、D 两组进行一次性 游泳运动至力竭后，断头取血，使用放射免疫检测血清中睾酮(T)、E2、促 性腺激素(HCG)和促性腺激素释放素(GnRH)含量；取双侧海马体，使用免 疫印迹检测 G 蛋白偶联受体 30(GPR30)、PI3K、Akt、B 淋巴细胞瘤-2(Bcl-2) 和一氧化氮合成酶(eNOS)蛋白表达量；安静组同样方法采集样品检测。结果：注射 E2 可以使大鼠血清 T 含量降低（P＜0.01），力竭运动也可 以降低血清 T 含量（P 小于 0.05），但力竭运动削弱了 E2 对 T 的降低效应（P＜0.05）；力竭运动使 PI3K、Akt、Bcl-2 和 eNOS 蛋白表达量降低(P＜ 0.05)，而注射 E2 使 PI3K、Akt、Bcl-2 和 eNOS 蛋白表达量提高（P＜0.05）， 并且力竭运动削弱了 E2 对 PI3K、Akt 蛋白表达量的提高效应（P＜0.05）。结论：1 外源性注射 E2 与力竭运动均能导致性腺轴反馈能力的减弱， 使雄性大鼠血液中的 T 含量降低，从而降低机体的运动能力。2 当雄性大鼠IIIIE2 含量过高时，运动可能会抑制 E2 对 HCG 的负反馈效应，使其促进 T 的分泌。3 力竭运动能够阻断 PI3K/Akt 信号通路，下调 Bcl-2、eNOS 的表达 量，对脑部产生损伤。4 外源性注射 E2 能够激活 PI3K/Akt 信号通路，上 调 Bcl-2、eNOS 的表达量，对脑部有神经保护功能。5 在力竭运动条件下， 外源性注射 E2 对 PI3K/Akt 信号通路无明显激活现象，推测力竭运动效应 占据主导，使脑部发生损伤。关键词 力竭运动；雌二醇；性腺轴；PI3K/Akt 信号通路 PAGE PAGE IVABSTRACTObjective: To observe effects of exogenous injection of E2 and acute exhaustive exercise on hormone and protein changes in the rat gonadal axis and the PI3K/Akt signaling pathway in the hippocampus, and to do a comprehensive analysis of the impact of acute exhaustive exercise and E2 on the exercise capacity, for exploring central fatigue during exercise produce and recovery mechanisms to provide experimental basis.Methods: 48 male SD rats were randomly divided into sedentary control group (A, n = 12), the exhaustive exercise group (n = 12), quiet estradiol grou