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银杏叶干燥方法优化及其机制探讨 　　[摘要] 为研究在不同干燥过程中银杏叶化学成分的变化规律，该文采用超高效液相色谱与三重四极杆质谱（UPLC-TQ/MS）联用技术，对银杏叶在自然晒干，阴干，35，45，60，80 ℃烘干过程中儿茶素类、黄酮及其苷类、双黄酮类、内酯类及酚酸类成分含量变化进行分析。结果表明80 ℃烘干条件下能起到“杀青”的作用，有利于银杏叶中儿茶素类、黄酮及其苷类、银杏内酯类等成分的转化积累，对双黄酮类成分含量影响不明显。可见80 ℃快速烘干法有利于银杏叶各类活性成分的保持，可为银杏叶药材的初加工工艺优化提供有益参考。 　　[关键词] 银杏叶；UPLC-TQ/MS；干燥方法优化；含量变化；机制探讨 　　银杏叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶，秋季叶尚绿时采收。本品味甘、苦、涩，性平，归心、肺经，具有敛肺，平喘，活血化瘀，止痛的功效，主用于肺虚喘咳，冠心病，心绞痛，高血脂症的治疗。近代科学研究证明[1-2]，银杏叶中含有丰富的黄酮苷、双黄酮、银杏内酯等化学成分以及人体所需的营养元素。银杏叶中还含有银杏酚酸，而其中的银杏酸是主要毒性成分，属细胞毒素，可能与诱导机体突变和致癌有关，能引起皮肤、黏膜等处的过敏性炎症反应，皮肤接触它常引起漆毒样皮炎[3]。 　　产地加工是药材生产与品质形成的重要环节，其间发生着从非药用部位的去除、药效物质的最大保留、毒性成分的降低、化学成分间的相互转化等物理化学变化，最终目的是生产出优质药材，保障临床用药的有效性和安全性，如在丹参的干燥过程中，随着温度的升高，以丹酚酸B为代表的缩合酚酸含量不断下降，以丹参素、原儿茶醛为代表的小分子含量不断上升，并有新的小分子生成，这些酚酸之间存在相互转化此消彼长的关系[4]；当归在微波干燥条件下，当归多糖含量高于晒干、阴干、熏干等方法，且促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖的效果最好[5]。但许多中药材采收后，各产地加工方法不一，干燥方法对质量的影响还缺乏研究。本文采用UPLC-TQ-MS联用技术，对银杏叶干燥过程中黄酮、内酯及酚酸类共24种成分含量变化进行了探讨，为银杏叶药材的产地初加工方法提供科学依据。 　　1 材料 　　Waters ACQUITY UPLC系统（包括四元泵溶剂系统，在线脱气机和自动进样器；Waters公司，Milford，USA）；Xevo TQ检测器（Waters公司）；MassLynx 4.1质谱工作站软件（Waters公司）；Pmb53型快速水分测定仪（德国Adam公司）；BT125型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；DHG-9240型鼓风干燥箱（杭州蓝天化验仪器厂）；EPED超纯水系统（南京易普达易科技发展有限公司）；KQ-250E型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）；Anke GL-16GII型离心机（上海安亭科学仪器厂）。 　　化学对照品儿茶素（877-200001）、表儿茶素（878-200102）、槲皮素（1000861-200406）、山柰酚（110861-200304）、异鼠李素（110860-200406）、木犀草素（111520-200504）、银杏内酯A（110862-201009）、银杏内酯B（110863-200508）、银杏内酯C（110864-200906）、白果内酯（110865-200605）、白果新酸（111690-200702）、槲皮素 3-O-[6-O-（α-L-鼠李糖）-β-D-葡萄糖苷] （100080-200306）均购自中国食品药品检定研究院，表没食子酸儿茶素（39825）、芹菜素（22806）、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷（43089）购自上海晶纯有限公司，其余为本实验室从银杏叶中分离自制，其化学结构经1H，13C-NMR和ESI-MS分析确认，纯度经HPLC检测均大于98%。甲酸和乙腈均为色谱纯，分别购自德国Merck公司和美国Tedia公司；去离子水为经易普易达超纯水制备系统自制；其他化学试剂均为分析纯，购自上海国药化学试剂公司。 　　银杏叶样品于2012年7月采自南京中医药大学校园内，经南京中医药大学段金廒教授鉴定为银杏科植物银杏G. biloba的叶。标本存放于江苏省方剂研究重点实验室内。 　　将刚采摘成熟度相同新鲜银杏叶均匀分成6批，除去叶柄，经快速水分测定仪测得其含水量为70%。分别采用晒干，阴干，35，45，60，80 ℃烘干3种方法进行干燥处理，干燥过程中利用快速水分测定仪定时测定其水分，并在各条件下水分损失相当时取样，将样品切成直径约1 mm的碎块后匀浆或粉碎，存放于-80 ℃冰箱中备用。 　　2 测定方法 　　2.1 对照品溶液制备 精密称定干燥至恒重的对照品适量，加80%甲醇制成储备液，再分别吸取适量制成质量浓度分别为 （-）表没