慢性高原病大鼠有核红细胞pi3k-akt信号通路变化及其对细胞凋亡的影响-changes of pi3k - akt signaling pathway in nucleated erythrocytes of rats with chronic altitude disease and its effect on cell apoptosis.docxVIP

万方数据 万方数据 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取 得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任 何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的 个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结 果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学 校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文 被查阅和借阅。本人授权青海大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入 有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本 学位论文。本论文属于：保密□不保密√（请在相应方框内打“√”），在 年解密后适用本授权书。 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 青海大 青海大学硕士学位论文 摘 要 摘 要 目的 本文建立 CMS 动物模型，研究慢性低氧环境对大鼠骨髓有核红细胞凋 亡及 Akt、Bcl-xl、caspase-9 表达的影响，观察塞来昔布干预的体内影响效应。 方法 91 只健康雄性 Wistar 大鼠，80 只大鼠随机分为 4 组：常氧组、低氧组、 低剂量干预组、高剂量干预组，每组 20 只。常氧组大鼠在西宁自然条件下喂 养，其他三组大鼠在低压氧舱。30 天后取动脉血用于血气分析和血常规检测； 分离血浆，ELISA 法检测 EPO 及 VEGF 含量；采集大鼠股骨骨髓液，提取单 个核细胞，FCM 检测其凋亡率；经抗体标记，FCM 检测 CD71+CD45- 有核红 细胞凋亡率及 Akt、Bcl-xl、caspase-9 表达。另外，随机选取常氧组大鼠 6 只， 低氧组大鼠 5 只，用于肺动脉压检测。 结果 与常氧组大鼠相比，低氧组、低剂量干预组、高剂量干预组的 HCT、 HGB、RBC 著增加（均 P 0.05），低氧组和低剂量干预组的 RBC 高于高剂 量干预组（均 P0.05）。与常氧组大鼠相比，低氧组、低剂量干预组、高剂量 干预组的 PLT 明显降低（均 P 0.05）；低剂量干预组 WBC 计数明显高于常 氧组、低氧组和高剂量干预组（P 0.05）。与常氧组大鼠相比，低氧组平均肺 动脉压显著升高(P 0.05）；常氧组和低氧组的 SaO2 相比无明显统计学差异 （P0.05）。低剂量干预组 EPO 水平低于常氧组、低氧组和高剂量干预组 (均 P 0.05），但后三组之间相比无统计学差异（P0.05）。与低氧组相比，高剂 量干预组 VEGF 水平显著增加（P 0.05），其它各组之间无明显统计学差异。 与常氧组相比，低氧组、低剂量干预组、高剂量干预组的有核红细胞的凋亡 率显著降低（P 0.05）。各组 Bcl-xl 蛋白表达水平无明显统计学差异。与常氧 组相比，低氧组 Akt 蛋白表达明水平显增加（P 0.05）。与低剂量干预组相比， 常氧组、低氧组、高剂量干预组 caspase9 表达水平显著降低(均 P 0.05）。 结论 结合外周血细胞学指标、肺动脉压测定结果等，CMS 动物模型造模成 功；CMS 大鼠骨髓有核红细胞凋亡减低，可能在 CMS 红细胞过度积累中发 挥一定作用；CMS 大鼠骨髓有核红细胞 PI3K-Akt 信号通路中的主要信号分子 Akt 表达增加，可能在 CMS 有核红细胞凋亡下调机制中发挥一定的作用；但 在研究中未观察到塞来昔布对 CMS 骨髓有核红细胞凋亡的调节作用。 关键词 慢性高原病 有核红细胞 凋亡 Akt Bcl-xl caspase-9 I 青海大学 青海大学硕士学位论文 Abstract Abstract Objective In this study, we established rat models of CMS and researched the impact of chronic hypoxia on apoptosis and expressions of Akt, Bcl-xl and caspase-9 proteins of erythroblasts. At the same time, the intervention function of celecoxib, which is Akt inhibitor, was observed in rats in vivo. Methods 91 healthy male Wistar rats from Lanzhou to Xining were involved in this study. The 80 rats were ran