上海地区猪链球菌2型流行病学调查及其pgk基因缺失株构建-epidemiological investigation of streptococcus suis type 2 in shanghai and construction of pgk gene deletion strain.docxVIP

目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 1 前言 1 HYPERLINK \l _bookmark1 1.1 猪链球菌病历史 1 HYPERLINK \l _bookmark2 1.2 病原学 1 HYPERLINK \l _bookmark3 1.3 流行病学 2 HYPERLINK \l _bookmark4 1.4 SS2 毒力因子的研究进展 2 HYPERLINK \l _bookmark5 1.5 致病机理 6 HYPERLINK \l _bookmark6 1.6 临床症状 6 HYPERLINK \l _bookmark7 1.7 动物模型 7 HYPERLINK \l _bookmark8 1.8 诊断 7 HYPERLINK \l _bookmark9 1.9 治疗和预防 8 HYPERLINK \l _bookmark10 1.10 猪链球菌耐药性的研究进展 8 HYPERLINK \l _bookmark11 1.11 研究的目的与意义。 11 HYPERLINK \l _bookmark12 2 试验部分 11 HYPERLINK \l _bookmark13 2.1 材料 11 HYPERLINK \l _bookmark14 2.1.1 病料及试验动物 11 HYPERLINK \l _bookmark15 2.1.2 主要试剂与仪器 12 HYPERLINK \l _bookmark16 2.1.3 培养基、抗生素配制 12 HYPERLINK \l _bookmark17 2.1.4 主要缓冲液 13 HYPERLINK \l _bookmark18 2.1.5 菌株及质粒 13 HYPERLINK \l _bookmark19 2.2 研究内容与方法 14 HYPERLINK \l _bookmark20 2.2.1 猪链球菌 2 型分离培养纯化 14 HYPERLINK \l _bookmark21 2.2.2 基因组和质粒提取 15 HYPERLINK \l _bookmark22 2.2.3 PCR 鉴定 15 HYPERLINK \l _bookmark23 2.2.4 猪链球菌 2 型耐药菌株筛选 17 HYPERLINK \l _bookmark24 2.2.5 SPF 巴马小型猪致病性试验 17 HYPERLINK \l _bookmark25 2.2.6 猪链球菌 2 型 PGK 基因上下游同源臂的扩增 18 HYPERLINK \l _bookmark26 2.2.7 克隆载体的构建及鉴定 19 HYPERLINK \l _bookmark27 2.2.8 自杀性重组质粒的构建与鉴定 20 HYPERLINK \l _bookmark28 2.2.9 猪链球菌 2 型 PGK 基因缺失株的构建及鉴定 21 HYPERLINK \l _bookmark29 2.3 结果 22 HYPERLINK \l _bookmark30 2.3.1 生长特性和培养特性 22 HYPERLINK \l _bookmark31 2.3.2 PCR 鉴定结果 23 HYPERLINK \l _bookmark32 2.3.3 猪链球菌 2 型对九种常用抗生素的敏感性测定结果 25 HYPERLINK \l _bookmark33 2.3.4 致病性试验 27 HYPERLINK \l _bookmark34 2.3.5 电转化的最佳条件 28 HYPERLINK \l _bookmark35 2.3.6 猪链球菌 2 型 PGK 基因的克隆与构建载体的鉴定 30 HYPERLINK \l _bookmark36 3 小结与讨论 33 HYPERLINK \l _bookmark37 3.1 PCR 鉴定 33 HYPERLINK \l _bookmark38 3.2 致病性试验 34 HYPERLINK \l _bookmark39 3.3 猪链球菌对常用的九种抗生素的敏感性 34 HYPERLINK \l _bookmark40 3.4 猪链球菌的电转化条件 36 HYPERLINK \l _bookmark41 3.5 pSET4s 自杀性穿梭质粒在缺失菌株构建中的问题 37 HYPERLINK \l _bookmark42 3.6 突变菌株的构建 38 HYPERLINK \l _bookmark43 4 结论 38 HYPERLINK \l _bookmark44 致 谢 39 HYPERLINK \l _