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97%溴苯腈原药对赤子爱胜蚓急性毒性试验研究 　　摘要：采用人工土壤试验方法，以7 d和14 d为试验周期，进行了农药97%溴苯腈原药对赤子爱胜蚓（Eisenia foetida）的急性毒性试验。试验结果表明：人工土壤试验空白对照组的蚯蚓死亡率为0，满足质量控制要求。采用人工土壤试验7 d和14 d时97%溴苯腈原药的半数致死浓度（LC50）分别为22.5 mg a.i./kg干土和21.8 mg a.i./kg干土，且随着97%溴苯腈原药浓度的升高赤子爱胜蚓的死亡率也在逐渐增加，二者呈现出较为明显的线性关系。因此，农药97%溴苯腈原药对土壤生态环境具有潜在的生态风险，赤子爱胜蚓的死亡率可作为土壤对农药溴苯腈污染程度的一种生物指标。 　　关键词：溴苯腈；赤子爱胜蚓；急性毒性；研究 　　中图分类号：X174 　　文献标识码：A文章编号2016 　　1引言 　　蚯蚓是常见的一种陆生环节动物，对土壤中有机物质的分解转化具有重要作用，同时蚯蚓的活动可以改善土壤的结构，增强土壤的透气和排水保水功能。蚯蚓的运动和排泄物对改善土壤的质量非常有益，可使土壤的透气性保持良好，使土壤保持健康状态，对农业生产有重要作用。蚯蚓能疏松土壤，增加土壤有机质并改善其结构，还能够促进酸性或碱性土壤转变为中性土壤，使土壤适宜于农作物的生长。 　　蚯蚓能够在一定程度内消除环境污染。在土壤中保持健康的蚯蚓种群对于土壤生态环境的保护具有重要价值。由于蚯蚓能够吸收土壤中的汞、铅和镉等微量金属，这类金属元素在蚯蚓体内的聚集量远超外界含量。赤子爱胜蚯蚓存在于富含有机质的土壤中，对化学农药的敏感性与真正栖息在土壤中的蚯蚓类似。其生活周期短，繁殖能力强，易于在含各种有机废物的土壤中饲养。赤子爱胜蚓及其蚓茧容易购得，有利于确保采用同一品系。因此，蚯蚓可作为土壤生态环境中重金属污染的监测动物，随着化学新物质在农业生态环境中的广泛应用，蚯蚓的生态毒理学研究得到了较大的发展，赤子爱胜蚓已经成为环境生态毒理研究的一个标准指示生物。 　　溴苯腈（Bromoxynil），又称伴地农，化学名为3，5-二溴-4-羟基-1-氰基苯。是一种防除阔叶杂草的腈类除草剂，属于选择性苗后触杀型除草剂。微溶于水，可溶于丙酮。对大鼠经口急性毒性LD50为190 mg/kg，经皮急性毒性LD50为2000 mg/kg，可被叶片吸收，抑制光合作用而使杂草组织坏死。适用于小麦、大麦、黑麦、玉米和高粱等农作物田间，防除藜、苋、麦家公等一年生双子叶杂草。除单用外，还可以和多种除草剂混配，达到扩大除草谱。笔者以97%溴苯腈原药为受试物，采用人工土壤试验方法考察97%溴苯腈原药对赤子爱胜蚓的急性毒性试验。 　　2材料与方法 　　2.1供试动物 　　赤子爱胜蚓（Eisenia foetida），为《GB/T 31270.15-2014化学农药环境安全评价试验准则 第15部分：蚯蚓急性毒性试验》推荐使用蚓种，购自珠海市洪铭蚯蚓养殖园，由本中心实验室驯养和繁殖。蚯蚓驯养室环境条件温度为21～23 ℃，湿度为70%～90%，试验前，对2～3月龄蚯蚓至少驯养7 d；试验开始前24 h，把蚯蚓放在人工土壤中饲养。期间蚯蚓保持健康良好，大小基本一致，具有生殖环带，体重为300～600 mg。 　　2.2仪器设备与材料 　　2.2.1试验仪器 　　电子天平、人工气候箱、电子秤、加湿器、移液枪。 　　2.2.2试验耗材 　　大烧杯（1000 mL）、塑料薄膜、铁制托盘、培养皿、小烧杯、竹签。 　　2.2.3试验基质（人工土壤） 　　草炭，高岭土，石英砂，碳酸钙。配制人工土壤前，分别取一定量的上述各组分物质，在105 ℃条件下烘干后称重（恒重），测定各组分的含水量。然后按相应比例配制人工土壤，加入适量去离子水调节人工土壤的湿度至土壤干重的30%～35%，充分混合均匀后，备用。在试验开始前，添加一系列的受试物贮备液与上述配制好的人工土壤相混合，配置成不同浓度的试验土壤介质。供试用蚯蚓在试验前用去离子水冲洗两遍至表面干净。 　　2.3试剂 　　97%溴苯腈原药，由浙江禾本科技有限公司提供。 　　2.4实验方法 　　2.4.1受试生物的质量保证 　　驯养后的蚯蚓在进行试验前，采用人工土壤试验方法测定氯乙酰胺作为参比物进行蚯蚓敏感性检查，设置系列浓度为11.3、16.4、23.8、34.5和50.0 mg a.i./kg干土的参比物敏感性试验，试验方法同正式试验。结果显示，氯乙酰胺对蚯蚓急性毒性14 d-LC50为25.6 mg a.i./kg干土，满足参比物氯乙酰胺的14 d-LC50值在20～80 mg a.i./kg干土之间，供试蚯蚓的敏感性符合质量控制要求。