mTOR信号通路在缺血性脑损伤中作用及机制.docVIP

mTOR信号通路在缺血性脑损伤中作用及机制 　　DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.01.033 　　作者单位：330006，南昌 南昌大学第一附属医院急诊科 　　通信作者：黄亮， Email： HuangLiang6312@ 　　哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）是细胞内重要的信号分子，在各种刺激因素下激活后，通过mTORC1和mTORC2两种复合物介导下游，广泛调节生理活动，如细胞生长、新陈代谢、蛋白质合成与细胞存活等。近年来，mTOR信号通路在中枢神经系统中的作用引起极大关注[1]。目前已发现mTOR信号通路具有多种功能，包括阻止神经细胞凋亡、抑制自噬性细胞死亡、促进神经细胞再生及促进血管再生等，提示其具有防止缺血神经细胞死亡与促进组织修复的功能。在缺氧缺血性脑损伤过程中，伴随着能量消耗、氧化应激、细胞因子和细胞程序性死亡等多种病理生理过程[2]，研究显示，mTOR信号通路与这些病理生理过程存在紧密联系。 　　1 mTOR信号通路 　　 mTOR是一种进化上高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，属于磷脂酰肌醇激酶相关激酶（the phosphatidylinositol kinase-related kinase， PIKK）家族成员之一。mTOR的初级结构由几个保守的结构域构成，包括FRB区、FAT域和串联的重复HEAT单位[3]。生理状态下，mTOR与多种蛋白结合形成两种结构和功能不尽相同的大分子复合物：mTORC1（mTOR， raptor和MLST8）和mTORC2（mTOR， rictor和MLST8），二者活性主要通过其羧基末端特异性底物磷酸化调节，主要活化位点分别位于丝氨酸2448位点及丝氨酸2481位点[4]。在氧化应激、低能量状态（AMP/ATP比值增加）、营养物质（如葡萄糖、氨基酸）缺乏和生长因子释放等因素刺激下，mTOR信号通路被激活。 　　 mTOR上游有几种重要的信号分子，如磷脂酰肌醇3-羟基激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、丝氨酸/苏氨酸激酶肝激酶B1（LKB1）、AMP活化的蛋白激酶（AMPK）等。目前已知脑组织中存在多条mTOR信号通路，其中最重要的是PI3K-Akt-mTOR信号通路[5]和LKB1-AMPK-mTOR信号通路[6]。在生长因子刺激下，PI3K活化，进而通过磷脂酰肌醇依赖性激酶1、2（PDK1、PDK2）磷酸化Akt，导致mTORC1上游结节性硬化复合物TSC1-TSC2解聚，激活mTORC1;当机体处于低能量状态时，细胞内AMP水平上升，LKB1激活，在LKB1和AMP刺激下，AMPK活化，继而磷酸化并激活TSC1-TSC2，抑制mTORC1[7]。 　　 mTORC1下游效应因子主要是核糖体40S小亚基S6蛋白激酶（P70S6K）和翻译启始因子4E结合蛋白1（4EBP1），二者共同调节翻译起始速度、蛋白质合成与细胞生长，其中S6K能够促进延长因子-1a、poly（A）结合蛋白等蛋白质的转录与翻译，4EBP1则可增加低氧诱导因子-1（HIF-1）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、细胞周期蛋白D1等蛋白的表达[8]。 　　 mTORC2能在能量消耗、生长因子等因素刺激下激活，通过磷酸化包括PKC、Akt和SGK1在内的AGC激酶家族，发挥调节肌动蛋白、细胞骨架和细胞存活等作用[9]。 　　2 mTOR信号通路与缺氧缺血性脑损伤 　　 脑对缺氧缺血极其敏感，一旦缺氧缺血时间较长即可引起严重的不可逆性损伤，而这些损伤与mTOR信号通路息息相关[10]。细胞氧气、葡萄糖剥夺（oxygen and glucose deprivation， OGD）是常见的体外复制组织缺氧缺血模型的方法，Pastor等[11]在OGD造成星形细胞损伤条件下检测了S6K1表达，发现其表达量明显下降，用mTOR特异性抑制剂雷帕霉素进一步减少S6K1表达导致星形细胞损伤加重，而用腺病毒感染使S6K1表达增加可减少星形细胞损伤;在体内实验，对敲除S6K基因小鼠，永久性大脑中动脉闭塞（permanent middle cerebral artery occlusion， pMCAO）后小鼠脑组织梗死体积将增大，提示激活mTOR-S6K1通路对缺血造成的星形细胞损伤具有保护作用。通过缺血预处理[12]与缺血后处理[13]也能发现，缺血-再灌注损伤后脑组织中mTOR表达量增高有利于减少脑组织梗死体积，改善行为学不足，如用雷帕霉素降低mTOR表达则能解除其保护效应。近年来使用硫辛酸（alpha-lipoic acid）[14]和钩藤碱（rhynchophylline）[15]起到了保