儿童支气管哮喘血清IL4IL10和IFNγ浓度测定及其临床意义.docVIP

儿童支气管哮喘血清IL4IL10和IFNγ浓度测定及其临床意义 　　依据所分泌细胞因子的不同辅助性T细胞(Helper T cells,Th)可分为两个亚型,即Th1细胞和Th2细胞,Th1细胞主要分泌以IFN?γ为代表的细胞因子,Th2 细胞主要分泌 IL? 4、IL?10 为代表的细胞因子??[1]?。细胞因子在针对抗原刺激,调节淋巴细胞应答中起到关键作用,Th1/Th2细胞的失衡参与多种免疫性疾病的发生和发展??[2]?。为了探讨IL?4、IL?10和IFN?γ在支气管哮喘(bronchial asthma,简称哮喘)发病机制中的作用,本研究以健康儿童为对照,观察了哮喘儿童血清IL? 　　?? 　　基金项目:济南市卫生科技发展计划项目(项目编号:2006?27)? 　　作者单位:250022山东大学齐鲁儿童医院呼吸科? 　　 　　4、IL?10和IFN?γ水平的变化,以期探讨儿童哮喘的发病机制,并为临床诊疗新方法的开展提供依据。? 　　1 对象和方法? 　　1?1 研究对象 　　随机收集于2008年6月1日至2009年1月31日期间,在山东大学齐鲁儿童医院门诊就诊的哮喘患儿作为哮喘组,患儿皆处于发作期且未用药治疗。哮喘诊断标准全部符合2003年中华医学会儿科分会呼吸学组修订的支气管哮喘诊断标准??[3]?。共计47例,其中男28例,女19例。? 　　另外,随机选取性别和年龄与哮喘组相匹配的健康查体儿童作为正常对照者组。共计51例,其中男30例,女21例。? 　　以上受试对象或其家属均对本研究签署知情同意书。? 　　1?2 研究方法? 　　1?2?1 血液标本的收集和处理 使用一次性空白采血管采集受试者清晨空腹静脉血2 ml,放置4℃冰箱30~60 min,待血液凝集后3000rpm离心15 min,小心吸取上液,得到血清,?80℃保存待检。? 　　1?2?2 血清IL?4,IL?10及IFN?γ浓度的测定 血清IL?4,IL?10及IFN?γ浓度的测定采用双抗体夹心ELISA法检测,ELISA试剂盒购自上海西塘生物科技公司,操作严格按照说明书的操作步骤进行。各细胞因子检测的板内、板间变异系数均10%。? 　　1?3 统计学分析 　　用SPSS 11?0 for Windows 软件进行数据分析。计量资料以平均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验,方差不齐时采用Mann?Whitney 秩检验。计数资料采用χ?2检验。双侧检验,P0?05表示具有显著意义,P0?01表示具有非常显著意义。? 　　2 结果? 　　2?1 研究对象的一般资料 　　受试对象皆完成研究,资料均有效,皆纳入结果分析。哮喘组患儿共47例,其中男28例,女19例;平均年龄(2?49±1?28)岁。正常对照组儿童共51例,其中男30例,女21例;平均年龄(2?36±1?17)岁。二组之间的性别构成、年龄等差异无显著统计学意义(P0?05),具体见表1。? 　　 　　2?2 哮喘组与正常对照组血清IL?4,IL?10和IFN?γ浓度及其比较 　　分别以IL?4、IL?10和IFN?γ系列浓度标准品与相应吸光度(OD)制作IL?4、IL?10和IFN?γ标准曲线,并建立回归方程。IL?4标准曲线标准品浓度与相应吸光度(OD)的相关性0?998,回归方程为:Y=?101?451+1242?619X。IL?10标准曲线标准品浓度与相应吸光度(OD)的相关性0?992,回归方程为:Y=?157?564+952?507X。IFN?γ标准曲线标准品浓度与相应吸光度(OD)的相关性0?994,回归方程为:Y=?131?688+1062?686X。以上回归方程中Y代表样品浓度,X代表样品OD值。根据每个样品各细胞因子的OD值,推算相应的浓度大小,结果见表2。? 　　表2显示哮喘组血清IL?4浓度(346?74±82?92)pg/ml显著高于正常对照组(199?87±59?25)pg/ml(P0?05);哮喘组血清IFN?γ浓度(94?51±22?92)pg/ml低于正常对照组(110?75±47?11)pg/ml(P0?05)。? 　　3 讨论? 　　哮喘是儿童期最常见的慢性呼吸道疾病,以气道阻塞、气道炎症和气道高反应性为特征。近年来,哮喘的发病率和死亡率呈逐年上升的趋势。全球约3亿哮喘患者,各国患病率1%~13%不等,2000年我国调查显示,中国城区儿童哮喘患病率为1?97%,哮喘已经成为全球范围内严重的公共卫生问题之一。关于哮喘的病因有许多学说,如1966年石坂等提出IgE学说,1968年Szentivanye提出β肾上腺阻断学说,1983年Holtzman等提出呼吸道炎症学说,近年来有学者又提出了Th1/T