复合氰基丙烯酸酯骨形态发生蛋白生物胶预防大鼠牙槽嵴萎缩实验研究.docVIP

复合氰基丙烯酸酯骨形态发生蛋白生物胶预防大鼠牙槽嵴萎缩实验研究 　　[摘要] 目的 制备复合氰基丙烯酸酯-骨形态发生蛋白（BMP）生物胶，并植入大鼠拔牙窝观察其预防牙槽嵴萎缩的效果。方法 选用Wistar大鼠54只，随机分为3组：实验组（复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶组）、对照组（壳聚糖温敏性胶体组）、空白对照组。拔除大鼠下颌切牙后，实验组和对照组在牙槽窝内即刻植入复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶、单纯壳聚糖温敏性胶体，空白对照组则不植入任何材料。3组动物在植入后3、6、9周处死，分离切取下颌骨，用高频钼靶扫描仪获得图像信息，使用Image-Pro Plus软件处理图像，得到剩余牙槽嵴相对高度和牙槽窝相对光密度，组织学观察牙槽窝内的成骨情况。结果 术后3、6、9周，实验组的剩余牙槽嵴相对高度和牙槽窝相对光密度均高于对照组和空白对照组（P0.05）；组织学观察显示实验组牙槽窝成骨多于对照组和空白对照组。 　　结论 复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶可以用于预防拔牙术后剩余牙槽嵴萎缩，其临床应用前景广阔。 　　[关键词] 骨形态发生蛋白； 氰基丙烯酸酯； 壳聚糖； 牙槽嵴萎缩 　　[中图分类号] R 318.08 [文献标志码] A [doi] 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.06.006 　　牙齿拔除后牙槽嵴呈失用性、进行性萎缩，给以后的种植体植入和常规义齿（尤其是全口义齿）修复带来了极大的困难。42%的全口义齿修复不良都是牙槽嵴萎缩导致的义齿固位不好和咀嚼功能欠佳[1]。预防牙拔除术后牙槽嵴萎缩的研究一直是国内外研究的热门课题[2-3]。本研究以氰基丙烯酸正丁酯、壳聚糖为载体，加入重组人骨形态发生蛋白（recombi-nant human bone morphogenetic protein，rhBMP）制备成生物胶体复合氰基丙烯酸酯-骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）生物胶，在大鼠牙拔除术后即刻植入牙槽窝内，利用复合物的温敏性效应和氰基丙烯酸正丁酯的聚合作用，达到固化、止血、消炎、诱导牙槽窝新骨形成的目的，从而预防牙槽嵴的萎缩[4-7]，为今后复合胶体在临床的应用 　　提供实验依据。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 实验动物 54只6～8周龄清洁级Wistar大鼠，雌雄各半，体重180～200 g，由兰州军区总医院动物实验中心提供。分笼饲养（5～6只/笼），饲养温度（22±2） ℃，每日光照12 h，自由饮水，静养1周。 　　1.1.2 试剂及仪器 rhBMP（BBI公司，加拿大），β- 　　甘油磷酸钠（Sigma公司，美国），氰基丙烯酸正丁酯（北京瞬康科技发展有限公司），壳聚糖（青岛海汇生 　　物有限公司），磁力搅拌机（上海大中分析仪器厂），水浴箱（巩义市予华仪器有限责任公司），高频钼靶扫描仪（Planmed Sophie公司，芬兰）。 　　1.2 复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶及壳聚糖温敏 　　性胶体的制备 　　复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶的制备[4，8]：将壳 　　聚糖溶解于浓度为16 mol·L-1的乙酸溶液中，在磁力搅拌器下按1∶1的比例逐滴加入到1.30 mol·L-1 β-甘油磷酸钠溶液中，再持续搅拌0.5 h，制备成温敏性胶体。在此基础上使用95%盐酸溶液将已经准备好的温敏性胶体调至pH值3.5，边搅拌边滴加适量氰基丙烯酸正丁酯，所得溶液中加入rhBMP使终溶液中rhBMP为100 μg·L-1，磁力搅拌器常温下持续搅拌 　　3 h，密封后4 ℃冰箱保存备用。制备物最终状态为白色胶体，半流动。 　　壳聚糖温敏性胶体的制备：方法同复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶，止于温敏性胶体的制备，不放入rhBMP及氰基丙烯酸正丁酯。 　　1.3 动物分组及手术 　　54只Wistar大鼠随机分为3组：实验组（复合氰基丙烯酸酯-BMP生物胶组）、对照组（壳聚糖温敏性胶 　　体组）、空白对照组，每组18只，雌雄各半。 　　在吴哲等[9]建立大鼠剩余牙槽嵴吸收模型的基 　　础上加以改进，分别于拔牙前12、9、6 d，麻醉大鼠（10%水合氯醛，腹腔注射，300 mg·kg-1），使用 　　持针器齐牙龈处夹断左侧中切牙牙冠造成冠折，用探针或细针向牙髓方向伸入，使牙髓损坏加剧。拔除牙齿时，自制探针分离牙龈，用持针器沿近远中方向夹持，顺牙冠根方向完整脱位。牙拔除后，即刻将氰基丙烯酸正丁酯-BMP生物复合胶、壳聚糖温敏性胶体，使用注射器（针头呈一定曲度弯曲，与牙 　　长轴平行）分别送入实验组和对照组的牙槽窝。空 　　白对照组不放入任何材料，牙槽窝血液自行填满，凝固。术后5 d，每日腹腔注射庆大霉素（10万U/只）预防感染。 　　1.4 标本分离并检