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宫颈癌中PAI1MDM2表达及意义 　　【摘要】目的 探讨PAI-1、MDM2在宫颈癌中的表达，分析其在宫颈癌发生、发展中的作用。方法 采用免疫组织化学方法检测宫颈癌组织63例，正常宫颈组织15例（对照组）中PAI-1、MDM2的表达。结果 1. PAI-1在正常对照组、宫颈原位癌、高分化组、中低分化组中的阳性表达率差异有显著性（P＜0.01），PAI-1与病理分级有相关性。2. MDM2在对照组与肿瘤组的表达率差异有显著性（P＜0.05），肿瘤组内仅原位癌组与中低分化组表达率差异有显著性（P0.05）。3.在宫颈癌中PAI-1、MDM2表达无相关性。结论 在宫颈癌组织中PAI-1、MDM2的异常表达提示与肿瘤的发生、发展密切相关。 　　【关键词】PAI-1MDM2 宫颈癌 免疫组化 　　中图分类号：R737.3文献标识码：B文章编号：1005-0515（2011）10-053-02 　　子宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤，占女性恶性肿瘤死亡原因的第二位[1]。在新疆，维吾尔族妇女子宫颈癌患者的死亡率为15.78/10万，汉族为9.98/10万[2]。国内外研究证实[3]，纤溶酶原激活剂抑制剂1型（PAI-1）在不同肿瘤的侵袭和转移过程中起着不同的作用；MDM2基因为一癌基因，作为p53重要的下游基因，MDM2与p53间存在互相反馈调节作用，p53的活化促进MDM2表达，同时MDM2又结合p53，抑制其功能，促进其降解,可导致瘤细胞继续增殖，失去正常的周期控制能力。我们采用免疫组化方法研究PAI-1和MDM2在宫颈癌中的表达及意义。 　　1 一般材料 　　1.1 标本来源 　　随机选取新疆医科大学第一附属医院病理科1994年至2004年63例宫颈癌组织活检标本，均经组织病理证实。维吾尔族共40例，年龄27-88岁，平均年龄44岁，汉族共23例，年龄28-70岁，平均年龄43岁，其中宫颈原位癌8例，宫颈高分化鳞状细胞癌27例，宫颈中低分化鳞状细胞癌28例，并选择正常宫颈组织15例作为正常组。 　　1.2 试剂 　　采用EnVision二步法，一抗为兔抗人PAI-1、鼠抗人MDM2多克隆抗体浓缩型，购自博士德生物有限公司。二抗采用兔抗鼠IgGEnVisionTM免疫组化检测试剂即用型工作液，购自DAKO（达克）公司。 　　1.3 实验方法 　　2um厚石蜡切片脱腊至水化，3％过氧化氢溶液室温孵育10分钟以消除内源性过氧化物酶，微波炉中火10分钟进行抗原修复，修复液为预热的Tris-EDTA(PH9.0)，室温冷却30分钟，TBS(PH7.6)缓冲液冲洗每次3分钟，3次，滴加一抗，室温过夜；TBS缓冲液冲洗每次3分钟，共3次，滴加二抗，37℃温箱孵育1小时；TBS缓冲液冲洗每次3分钟，共3次，滴加DAB显色剂，DAB稀释度1：40，光镜下观察显色情况，自来水终止显色，最后苏木素复染，脱水、透明、封片。 　　1.4 染色结果判断 　　将制好的切片置显微镜下观察，阳性染色为细胞浆内有棕黄色颗粒，每张切片在光学显微镜下取4个高倍视野，各计数200个细胞，按阳性细胞百分比对每张切片的染色强度评分。阳性细胞数＜5%为阴性（―），6%～20%为弱阳性（+），21%～50%为阳性（++），＞51%为强阳性（+++）。 　　1.5 统计学处理 　　采用SPSS17.0软件包分析资料，利用率的x2检验进行统计分析，检验水准α=0.05。 　　2 结果 　　2.1 PAI-1在对照组及宫颈癌组的表达情况 　　 　　表1 PAI-1在正常对照组、子宫颈癌中的表达 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　注:P＝0.000＜0.01 　　如表1所示，PAI-1阳性表达在细胞浆，在原位癌、各级宫颈癌中均有表达，对照组与肿瘤组，肿瘤组内部（除原位癌组与高分化组外）均存在显著性差异（P＜0.01）。 　　2.2 MDM2在正常对照组及子宫颈癌中的表达 　　 MDM2阳性表达部分定位于细胞核，部分定位于细胞浆，在正常对照组中、原位癌中未见阳性表达，高分化组4例阳性，中低分化组10例阳性，对照组与肿瘤组表达率 有显著性差异（p0.05），而肿瘤组内部仅原位癌组与中低分化组表达率有显著性差异（p0.05）(表2)。 　　表2 MDM2在正常对照组、子宫颈癌中的表达 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　注:A:(B+C+D)P=0.0440.05;C:DP=0.0750.05;B:CP=0.250.05;B:DP=0.0470.05 　　2.3 PAI-1、MDM2在宫颈癌中的共同表达 　　表3 PAI-1、MDM2在宫颈癌中表达的相关分析 　　 　　 　　 　　 　　 　　如表