TRPC3参与糖氧剥夺致培养的少突胶质细胞凋亡-人体解剖与组织胚胎学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 TRPC3 transient receptor potential channel 瞬时受体电位通道蛋 白 OGD oxygen glucose deprivation 糖氧剥夺 B104CM the conditioned medium prepared from B104 neuroblastoma cells B104 条件培养基 MBP myelin basic protein 髓鞘碱性蛋白 Pyr3 ethyl-1-(4-(2,3,3-trichloroacrylamide)phe nyl)-5-(trifluoromethyl)-1H-pyrazole-4-ca rboxylate fluo-3 (6a,11b,16a)-6-Fluoro-11,21-dihydroxy-1 6,17-[(1-methylethylidene)bis(oxy)]-preg na-1,4-diene-3,20-dione 吡唑化合物 氟尼缩松 OPC oligodendrocyte precursor cells 少突胶质细胞前体细 胞 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EDTA ethylene diaminetetraacetic acid 乙二胺四乙酸 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PDL polylysine 多聚赖氨酸 FCM flow cytometer 流式细胞术 NAC N-acetyl-L-cysteine N-乙酰基-L-半胱氨酸 bFGF basic fibroblast growth factor 碱性成纤维细胞生长 因子 PDGF-AA platelet-derived growth factor receptor-alpha 血小板源性生长因子 α 受体 DAPI (4,6-diamidino-2-phenylindole) 4,6- 二脒基 -2- 苯基吲 1 HBSS hanks balanced salt solution 哚 Hanks 平衡盐溶液 OD optional density 光密度 PVDF poly vinylidene fluoride 聚偏二氟乙酸 rpm rounds per minute 每分钟转速 s second 秒 min minute 分 h hour 小时 SDS sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸铵 TEMED N,N,N,N-Tetramethylethylenediamine 四甲基二乙烷 Tris tris (hydroxymethyl) aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 μg microgram 微克 μl microliter 微升 WB western blot 蛋白印迹法 2 TRPC3 参与糖氧剥夺致培养的少突胶质细胞凋亡 摘 要 背景： 随着社会人口老龄化，神经退行性疾病的发病率日益增高，而临 床上，对于这类疾病尚无有效控制病程进展的措施。瑞士研究者发现 神经系统退行性疾病与髓鞘脱失有关，进一步研究证明少突胶质细胞 退化导致脱髓鞘，少突胶质细胞对缺血缺氧损伤较其他胶质细胞敏感， 在大脑的某些特定区域甚至比神经元对缺血缺氧损伤更敏感。因此， 有学者提出少突胶质细胞的缺血缺氧损伤是神经退行性疾病重要原因。 钙离子是调节各个流程的通用第二信使，是细胞间信号传递的关 键离子，钙稳态紊乱是缺氧缺血后神经细胞死亡诸多途径的共同节点。 介导外钙内流主要有：电压依赖的和非电压依赖的钙通道两种方式， 瞬时受体电位通道蛋白(transient receptor potential channel，TRPC)是一 类非电压依赖跨膜蛋白，是维持 Ca2+稳态的重要离子通道。TRPC 在中 枢神经系统表达广泛，参与了神经系统很多重要的生理功能，其中 TRPC3 在中枢神经系统中表达最广泛。研究表明 TRPC3 异常激活可致 神经退行性疾病，但是 TRPC3 是否参与缺血缺氧少突胶质细胞的损伤， 目前并不清楚。 3 我们为研究 TRPC3 是否参与缺血缺氧少突胶质细胞的损伤，本实 验体外培养少突胶质细胞，建立少突胶质细胞糖氧剥夺（oxygen glucose deprivation，OGD）模型，采用了 TRPC3 阻断剂 Pyr3 阻断 OGD 少突 胶质细胞后，检测少突胶质细胞存活和凋亡的变化及细胞内钙离子浓 度的改变。旨在探讨 TRPC3 是否参与了糖氧剥夺少突胶质细胞凋亡， 为神经