TRPM7调控肝纤维化大鼠HSC的增殖、胶原合成和降解以及部分机制研究-药理学专业论文.docx

4 . 1 T R P M7 蛋 白在 人 纤 维化 肝组 织中 表 达 增加 3 1 4 . 2 T R P M 7 在 肝 纤 维 化 大 鼠 中 表 达 变 化 3 2 4 . 2 . 1 C C l 4 诱 导 肝 纤 维 化 大 鼠 肝 脏 病 理 学 改 变 3 2 4.2.2 免疫组化法检测纤维化大鼠肝组织中 TRPM7 和 α-SMA 蛋白表 达 3 4 CCl4 诱导肝纤维化大鼠肝组织 TRPM7、α-SMA 和 Col1α1 mRNA 和蛋白的表达 3 4 CCl4 诱导肝纤维化大鼠 HSC TRPM7、α-SMA 和 Col1α1 mRNA 的表达 36 PDGF-BB、TGF-β1 上调 HSC-T6 细胞 TRPM7 表达 37 AG1295、LY2109761 抑制 HSC-T6 中 PDGF-BB、TGF-β 诱导 T R P M 7 表达 4 0 4.3 阻断 TRPM7 表达对 HSC-T6 活化和胶原合成的影响 41 4.3.1 TRPM7 非选择性抑制剂 2-APB 减少活化的 HSC-T6 细胞 α-SMA、 C o l 1 α 1 m R N A 和 蛋 白 的 表 达 4 1 TRPM7-siRNA 转染后 HSC-T6 细胞 TRPM7 mRNA 和蛋白表达 变化 4 3 siRNA 沉默 TRPM7，HSC-T6 细胞 α-SMA、Col1α1mRNA 和蛋 白的表达变化 4 6 4.4 阻断 TRPM7 表达对 TGF-β1 诱导的 HSC-T6 胶原降解的影 响 4 9 4.4.1 CCl4 诱导纤维化大鼠肝组织中 MMPs 和 TIMPs 表达变化 49 4.4.2 siRNA 沉默 TRPM7 对 TGF-β1 诱导 HSC-T6 中 MMPs 和 TIMPs 表达的影响 5 1 4.5 阻断 TRPM7 通道对 PDGF-BB 诱导 HSC-T6 增殖的影响 55 TRPM7 非选择性抑制剂 2-APB 抑制 PDGF-BB 诱导 HSC-T6 细 胞 活力 5 5 TRPM7-siRNA 抑制 PDGF-BB 诱导 HSC-T6 细胞活力 56 阻断 TRPM7 抑制 PDGF-BB 诱导 HSC-T6 中 CDK4，Cyclin D1 和 P C N A 蛋白表达 5 6 4.6 TRPM7 调控 PDGF-BB 诱导 HSC-T6 增殖的信号转导机制 59 4.6.1 p-AKT 和 p-ERK 蛋白在大鼠纤维化肝组织中表达变化 59 TRPM7 非选择性抑制剂 2-APB 减少活化的 HSC-T6 细胞 p-AKT 和 p - E R K 蛋 白 的 表 达 5 9 siRNA 沉默 TRPM7 对 PDGF-BB 诱导 HSC-T6 中 p-AKT 和 p-ERK 蛋 白 表 达 的 影 响 6 1 4.6.4 TRPM7 非选择性抑制剂 2-APB 减少活化的 HSC-T6 细胞 p - P 7 0 S 6 K 蛋 白 的 表 达 6 2 siRNA 沉默 TRPM7 减少活化的 HSC-T6 细胞 p-P70S6K 蛋白的 表达 6 3 阻断 PI3K 和 ERK 通路对 TRPM7 影响 64 4.7 TRPM7 调控 TGF-β1 诱导 HSC-T6 胶原合成和降解的信号转导通 路 66 4 .7 .1 S ma d s 蛋白 在大鼠 纤维化 肝组 织中表 达变化 6 6 4.7.2 siRNA 沉默 TRPM7 对 HSC-T6 中 TGF-β1/Smads 信号转导通路 影响 6 8 5 讨论 70 5.1 TRPM7 在纤维化肝组织和活化 HSC 中表达增加 70 5.2 阻断 TRPM7 通道抑制活化 HSC 中胶原合成 71 5 . 3 T R P M 7 对 TGF - β1 诱 导 活 化 的 H S C 中 胶 原 降 解 的 影 响 72 5 . 4 阻断 T R P M 7 通 道 抑 制 P D G F - BB 诱 导 活 化 的 H S C 增 殖 7 3 PI3K/AKT、ERK 通路参与 TRPM7 调控 PDGF-BB 诱导活化的 HSC 增殖 . . 74 TGF-β1/Smads 通路参与 TRPM7 调控 HSC 胶原合成和降 解 7 4 6 结论 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 6