TRPM8在慢性非细菌性前列腺炎SD大鼠前列腺组织的表达及意义-外科学(泌尿外)专业论文.docxVIP

安徽 安徽医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 主要英文缩略词表 PBS Phosphate Buffer Saline 磷酸盐缓冲液 EPS Expressed Prostatic Secretions 前列腺液 FCA Freund’ s Complete Adjuvant 弗氏完全佐剂 IPUR Intraprostatic Urinary Reflux 前列腺尿液反流 cAMP Cyclic Adenosine Monophosphate 环磷酸腺苷 SOC Store-Operated Ca2+ Channels 钙池操纵性钙通道 TNF Tumor Necrosis Factor 肿瘤坏死因子 CaMK Calmodulin-Dependent Protein Kinase 钙调蛋白依赖性蛋白激酶 ROCC Receptor Operated Calcium Channel 受体操纵式钙通道 RACC Receptor Activated Calcium Channel 受体激活的钙通道 GPCR G Protein Coupled Receptor G 蛋白偶联受体 CaM Calmodulin 钙调蛋白 TRP Transient Receptor Potential 瞬间感受器电位 CatSper Cation channels of Sperm 电压门控阳离子通道 CNGs Cyclic Nucleotide Gated Channels 环核苷酸门控通道 CP chronic prostatitis 慢性前列腺炎 CBP Chronic baterial prostatitis 慢性细菌性前列腺炎 CPPS Chronic pelvic pain syndrome 慢性骨盆疼痛综合症 IPSS International prostate symptom score lower urinary tract epithelium LUED dysfunction LUTS lower urinary tract symptoms 国际前列腺症状评分 下尿路上皮功能障碍 下尿路症状 NIH national institute health 美国国立卫生院 P probability 概率 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应 CAP Chronic abacterial prostatitis 慢性非细菌性前列腺炎 TRPM8 在慢性非细菌性前列腺炎 SD 大鼠前列腺组织的 表达及意义 中文摘要 目的：建立慢性非细菌性前列腺炎动物模型，探讨炎症组 SD 大鼠与正常对照组 SD 大鼠前列腺组织中瞬时受体电位通道（M8 亚型）表达及其差异。 方法：取 2 月龄健康雄性 SD 大鼠 50 只，体重 180g-220g，取 SD 大鼠 10 只,脱颈 椎法处死,无菌条件下剥取前列腺组织,剔除其他杂质并洗净，在干燥的无菌青霉 素小瓶中用眼科剪将组织剪碎至 1mm3，加入含 0.5%Triton X-100 的生理盐水溶液, 低温匀浆,4℃ 15000 离心,30min,取上清液，经蛋白定量后，用 0.01M pH7.4 的 PBS 缓冲液稀释为 40mg/ml，将大鼠前列腺蛋白提取液与弗氏完全佐剂等比例充分 混匀乳化制成抗原液，备用。将 40 只大鼠按完全随机化原则分成正常对照组（n=20） 和实验模型组（n=20），分别在第 1 天和第 7 天对实验组 20 只大鼠在腹股沟区及 背侧皮内多点注射抗原液 1ml，同时腹腔注射百白破疫苗 0.5ml。对照组分别行腹 腔及皮内多点注射生理盐水注射液 0.5、1.0 ml。在造模第 8 周后，无菌条件下取 出前列腺于超净台上剔除前列腺上的血管、被膜及脂肪等杂质，取部分组织块用 甲醛液固定做病理，其余组织块立即置于 5 倍体积的 RNALATER 试剂中，-80℃保 存备用。用 trizol 提取总 RNA，逆转录后 SYBR Green I 实时定量 PCR 测量 TRPM8mRNA 相对表达水平，比较两组间的差异。 结果:造模 8 周后，正常对照组 SD 大鼠前列腺组织光镜下未发现炎症表现，动物 模型组可见前列腺血管内聚集大量红细胞，前列腺腺管腔内及周围见大量炎细胞 浸润，部分组织还可见局限性坏死，与典型慢性前列腺炎病理特征相吻合。实验 模型组与正常对照组 SD 大鼠前列腺组织内均见 TRPM8mrna 表达，实验模型组和正 常对照组前列腺组织中 TRPM8mrna 和内参照管家基因 GAPDH 的比值分别为 0.811 ±0.044、0.937±0.050(P0.05)。 结论:应用弗氏完全佐剂免疫造模法建造大鼠