TRAIL影响人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株对紫杉醇敏感性的分析-肿瘤学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 目 录 中英文缩略词表 1 中文摘要2 英文摘要4 引言6 材料和方法 9 结果23 讨论29 结论32 参考文献33 致谢38 综述39 中英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文 ABCB1 ATP-binding cassette，sub-family B member 1 ATP 结合盒亚科 B 运载体 1 Bax BCL2 associated x protein Bcl2 相关 x 蛋白 Bcl-2 B-Cell lymphoma/leukemia-2 B 细胞淋巴瘤/白血病-2 Caspase Cysteinyl aspartate specific protein 半胱氨酸天冬氨酸特异性 蛋白酶 DD Death Domain 死亡结构域 DR4 Death receptor4 死亡受体 4 DR5 Death receptor5 死亡受体 5 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FITC Fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 IC50 Half inhibitory concentration 半数抑制浓度 MTT Thiazolyl blue tetrazolium brom- ide 噻唑兰 NSCLC Non-Small Cell Lung Cancer 非小细胞肺癌 OD Optical density 光密度 PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液 PI Propidium iodide 碘化丙啶 PS Phosphatidylserine 磷脂酰丝氨酸 TRAIL Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 肿瘤坏死因子相关凋亡诱 导配体 TRAIL 影响人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株 对紫杉醇敏感性的研究 中文摘要 目的： 探索 TRAIL 干预后人肺腺癌紫杉醇耐药株对紫杉醇敏感性的变化及其可能 机制。 方法： 1．建立并鉴定人肺腺癌紫杉醇耐药株：用含低浓度紫杉醇培养液持续培养 人肺腺癌 A549 细胞株，逐渐增加剂量诱导建立耐药亚株 A549/Taxol-R。用 RT-PCR 方法检测细胞耐药相关基因 mRNA 的表达，MTT 法检测药物半数抑制 浓度（IC50），判断细胞对药物敏感性。 2．检测 TRAIL 和紫杉醇干预对 A549/Taxol-R 体外增殖和凋亡的影响： TRAIL 和紫杉醇单独或联合干预 A549/Taxol-R 后，用 MTT 法检测药物半数抑 制浓度（IC50），流式细胞仪检测细胞凋亡率变化。 3．检测 TRAIL 和紫杉醇干预对 A549/Taxol-R 凋亡相关基因的表达情况影 响：用 TRAIL 和紫杉醇单独或联合干预后，用 Western Blot 检测 Caspase-3 活性 裂解片段表达，用 RT-PCR 检测凋亡相关基因 Bax 和 Bcl-2 mRNA 的表达情况。 结果： 1．成功诱导培养了人肺腺癌 A549 细胞的紫杉醇耐药株 A549/Taxol-R。相 比其亲代细胞，A549/Taxol-R 对紫杉醇的敏感性明显降低，同时其 MDR1 基因 呈高表达。 2．MTT 结果显示：TRAIL 和紫杉醇联合使用对 A549/Taxol-R 细胞的生长 抑制率超过两者单独使用（P0.05），两药具有协同作用。流式细胞细胞仪结果 显示：TRAIL 和紫杉醇联合使用对 A549/Taxol-R 细胞的凋亡率超过两者单独使 用。 3 ． Western Blot 和 RT-PCR 显示： TRAIL 通过 Caspase-3 途 径 诱 导 A549/Taxol-R 凋亡。凋亡相关基因 Bax 和 Bcl-2 参与调节其凋亡。 结论： 1. TRAIL 在体外具有提高人肺腺癌 A549 细胞株的 MDR 亚株 A549/Taxol-R 细胞对紫杉醇的敏感性的作用； 2．TRAIL 可能是通过促进肿瘤细胞凋亡来提高人肺腺癌 A549 细胞株的 MDR 亚株 A549/Taxol-R 细胞对紫杉醇的敏感性，机制与其促进 Bax 的表达、下 调 Bcl-2 的表达，从而上调 caspase-3 的表达有关。 关键词：肺癌；化疗；耐药；紫杉醇； A study on the effect of TRAIL on the sensitivity of a paclitaxel-resistant human lung adenocarcinoma cell line to paclitaxel ABSTRACT OBJECTIVE: Observe whether