平痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑组织中γ氨基丁酸含量影响.docVIP

平痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑组织中γ氨基丁酸含量影响 　　摘 要：γ-氨基丁酸(GABA)是脑组织中的游离氨基酸，GABA是中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质。癫痫的发病与GABA的消长密切相关，当脑内的GABA含量降低时癫痫易于发生。通过平痫冲剂对实验性癫痫幼龄大鼠脑组织中GABA含量的影响，探讨平痫冲剂抗癫痫的作用机制。实验结果显示平痫冲剂能升高实验性癫痫大鼠脑组织中GABA的含量，与空白对照组对比有显著性意义；其平痫冲剂抗癫痫的作用机制可能是通过抑制大脑颞叶皮质及海马兴奋性神经递质受体的活性与表达，从而降低大脑皮质的兴奋性，有效抑制癫痫的形成及发展。 　　 　　关键词：平痫冲剂；戊四唑致痫大鼠；γ-氨基丁酸含量 　　中图分类号：R-33?文献标识码：A文章编号：?1673-7717（2008）11-2453-02 　　 　　 癫痫(epilepsy)是神经系统的一种常见的慢性脑部疾病，其发病机制非常复杂，目前较为一致的观点认为癫痫的发病是由于中枢神经系统兴奋与抑制失衡所致，癫痫发作时大脑神经元异常放电，导致短暂的中枢神经系统功能失常，具有突然发生、反复发作的特点。癫痫的发病与GABA的消长密切相关，当脑内的GABA含量降低时，癫痫易于发生。因而及时有效地提高实验性癫痫大鼠脑内GABA含量必将有益于癫痫脑细胞的存活。本实验旨在观察平痫冲剂对实验性癫痫大鼠脑组织中GABA含量的影响，探讨其抗癫痫的作用机理。 　　1 实验材料 　　1．1 实验动物 　　桑用SPF级wistear新生28天大鼠60只，体重（100±10）g，雌雄各半，母鼠喂养［动物及饲料均由甘肃中医学院医学实验动物中心提供，实验动物质量合格证编号：scxk（甘）2004-007-0001535］。 　　1．2 药品及试剂 　　平痫冲剂：甘肃中医学院附属医院药剂科提供；戊四唑：New Jresey,WSA：1-800-ACROS ORGANICS-01Geel，Belgium：++ 3214 575211；苯巴比妥：三九乃荣药业有限责任公司，生产批号：060105；GABA试剂盒：购自南京建成医学生物研究所，批号考马斯亮兰蛋白测定试剂盒：购自南京建成医学生物研究所，批号 　　1．3 实验仪器 　　电子分析天平：北京赛多利斯仪器系统有限公司，分类号型号：MC031105；紫外分光光度计：设备号：970673，分类号型号：UV-2401 PC；离心机：德国，设备号分类号型号：Primo；恒温箱：江苏省水坛市恒丰仪器厂，设备号型号：HH-601。 　　2 实验方法 　　2．1 动物分组 　　将60只Wistar幼龄大鼠适应性饲养1周后按体重编号，用随机数字表法[1]分为5组，每组12只，雌雄各半，分别为(A)正常对照组；(B)模型对照组；(C)平痫冲剂小剂量组；(D)平痫冲剂大剂量组；(E)药物对照组。 　　2．2 模型复制 　　按王丽的方法用戊四唑建立癫痫模型[2]，即除正常对照组每天腹腔注射生理盐水(30mg／kg)1次外，其余4组每天腹腔注射PTZ 30mg／kg(PTZ用蒸馏水配成15mg／mL溶液，用前1h新鲜配置)，各组注射连续28天，每次注射均在早上8：00～9：00进行。停药1周后，再用相同剂量的PTZ测试。每天观察、记录注射后30min内大鼠的行为变化。致痫标准采用7点评分法[3]，即0级：无惊厥；1级：点头或头部抽搐；2级：全身肌阵挛；3级：头部抽搐加前肢阵挛；4级：阵挛惊厥后加后腿站立；5级：跌倒；6级：全身强直一阵挛性惊厥。凡连续获5次2级或2级以上惊厥记录的大鼠被认为已完全点燃，即为癫痫模型。 　　2．3 给药及饲养 　　 造模成功后，开始灌胃给药。生药含量为5g／mL。灌胃剂量按成人与大鼠体表面积比折算成等效剂量：高剂量组：25mL/kg，低剂量组6mL/kg，药物对照组灌服苯巴比妥3．6mg／kg，分别相当于60kg成人每公斤体重的10、5、10倍量给药。正常对照组和模型对照组灌服等体积的生理盐水。每组大鼠灌胃1次，连续14天。各组大鼠均以普通灭菌饲料和灭菌水喂养。 　　2．4 标本采集与处理 　　脑组织中GABA的测定：脑组织匀浆制备[4]，GABA测定采用比色法，参照试剂盒说明书进行操作。 　　2．5 统计学处理 所有数据均输入计算机，采用SPSS13．0统计软件处理，实验数据以均数±标准差(±s)表示，采用单因素方差分析(analysis ofvariance)，显著性水平取α=0．05。 　　3 结 果 　　各组大鼠GABA含量的比较见表1。