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微波法提取草莓中抗氧化成分工艺研究
微波法提取草莓中抗氧化成分工艺研究
摘 要:采取沸水浴法、回流法、微波法、超声波法探讨草莓的抗氧化性,通过测定吸光度利用Fen-ton反应表征提取物对羟自由基的清除率。结果表明:微波法提取率较高。通过正交试验对微波法提取工艺进行优化,结果表明:最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%、提取时间3 min、微波功率40W;通过紫外吸收光谱表征了草莓的提取物。
关键词:草莓;抗氧化;微波提取法;正交试验法
中图分类号:TS 202.3
文献标志码:A
文章编号:0367-6358(2015)05-0303-04
在食品贮藏过程中,物质的过氧化作用是使食物变质的一个重要原因,抗氧化剂添加于食品有助于阻止油脂的氧化而被大量采用。目前有关抗氧化剂清除自由基的研究得到普遍关注,人们越来越趋向于使用天然抗氧化剂。
草莓不但味道甜美,其营养也十分丰富。它富含蛋白质、脂肪、糖类和各种维生素及微量元素。草莓中含有黄酮类化合物,黄酮类化合物具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗心律失常、抗氧化、增强机体的免疫力等保健作用。
本文采取沸水浴法、加热回流法、微波法、超声波法四种不同提取方法探讨草莓的抗氧化性,通过测定吸光度利用Fenton反应表征提取物对羟自由基的清除率并进行对比,从而找出草莓中抗氧化成分提取的最好方法,进而探讨提取试剂乙醇的体积分数、提取时间、提取功率对抗氧化活性的影响,确定最佳提取工艺条件,该研究结果可为草莓工业化生产黄酮类化合物提供一定的参考依据。
l 材料与提取方法
1.1 仪器与试剂
原料:新鲜草莓(市售)。
仪器:FAIJA系列电子天平(上海上平仪器公司);电子恒温水浴锅DZKW-4(北京中兴伟业仪器有限公司);VIS-7220型分光光度计(北京第二光学仪器厂);名秀光波GB023CTL-K3(佛山市顺德区格兰仕微波炉电器有限公司);KQ2200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);Cintral0紫外分光光度计(澳大利亚GBC科学仪器公司)。
主要试剂:95%乙醇(开封市芳晶化学试剂有限公司);硫酸亚铁(天津市化学试剂三厂);水杨酸(中国五联化工厂);30%过氧化氢(天津市永大化学试剂开发中心);以上所有试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 抗氧化性的测定
羟自由基清除体系:在试管中依次加入1.O mL 9 mmol/L水杨酸一乙醇溶液1.0 mL的提取液,1.0 mL Fe2+溶液,1.O mL蒸馏水,最后加入1.OmL 30%过氧化氢启动Fenton反应,37℃反应0.5h,在510 nm处测定吸光度A1;取1.O的蒸馏水代替30%过氧化氢测得的吸光度为A2;取1.O蒸馏水代替提取液所测得的吸光度为A3。清除率越大,表示该样品的抗氧化活性越强。
自由基的清除率P%的计算公式为:
P%=[1-(A1-A2)/A3]×100%式中:A1―样品的吸光度值;
A2―对照体系的吸光度值;
A3―空白组的吸光度值。
2.2 提取方法
选取新鲜完整的草莓,洗净晾干,去花萼,切块,捣碎,于阴凉处备用。
2.2.1 沸水浴法
称取草莓15.0000 g,加入200 mL 95%乙醇,于沸水浴中提取2h。抽滤,滤渣加入100 mL 95%乙醇,在同样条件下再次提取1h,抽滤后合并滤液,移取上清液测定其吸光度。
2.2.2 回流提取法
称取草莓15.0000 g,加入200 mL 95%乙醇,回流2h。抽滤,滤渣加入100 mL 95%乙醇,在同样条件下再次回流lh,抽滤后合并滤液,移取上清液测定其吸光度。
2.2.3 微波提取法
称取草莓15.0000g,加入200 mL 95%乙醇,在火力160W的微波炉中提取3 min。抽滤,滤渣加入100 mL 95%乙醇,在同样的条件下再次提取3min,抽滤后合并滤液,移取上清液测定其吸光度。
2.2.4 超声波提取法
称取草莓15.0000g,加入200 mL 95%乙醇,在超声频率40 kHz.超声功率100 W于室温下提取1h。抽滤,滤渣加入100 mL 95%乙醇,在同样的条件下再次提取1h,抽滤后合并滤液,移取上清液测定其吸光度。
3 结果与分析
3.1 抗氧化性分析:
4种提取方法测得的六组吸光度取平均值,自由基的清除率P%根据抗氧化性测定中的公式计算(见表1)。
由表1可以看出,在这4种方法中,从草莓中提取抗氧化成分采用回流法和沸水浴法耗时较长,效果较差。微波提取法所需时间短,清除率较高;而且微波法操作简单,提取过程中材料不易凝聚、不糊化。
3.2 单因素实验
设定乙醇浓度、微波
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