中药多糖的cze和cec测定分析-determination and analysis of cze and cec of polysaccharide from traditional chinese medicine.docxVIP

第 第 1 章 绪论 河北大 河北大学理学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 10 第 1 章 绪论 1.1 糖类物质概述 糖类化合物广泛存在于生物界，是生物体的组成物质，是除蛋白质和核酸之外的又 一类重要的生物大分子组分。糖类物质是多羟基（2 个或以上）的醛类或酮类化合物， 及其衍生物或聚合物，据此可分为醛糖和酮糖。绝大多数糖类化合物都可以用通式 Cn (H2O)n 表示。糖类物质还可根据碳原子数分为丙糖、丁糖、戊糖和己糖等，其中最简单 的糖类是丙糖（甘油醛和二羟丙酮）。按其所含糖残基数目的多少糖类物质又可分为单 糖、寡糖、多糖[1]。单糖常以环状形式存在，尤以五元环，六元环最为常见，它是构成 寡糖和多糖的最基本结构单元，最常见的单糖有葡萄糖、半乳糖、甘露糖和果糖等。寡 糖亦称低聚糖（Oligosacchrides），是由 2~10 个单糖经脱水缩合由糖苷键连接形成的具 有直链或支链的低度聚合糖类的合称。根据生物学功能又可将寡糖分为功能性寡糖和普 通寡糖两大类。蔗糖、麦芽糖、海藻糖、环糊精及麦芽寡糖属于普通寡糖，它们可被消 化吸收，产生能量。而功能性寡糖是指具有特殊的生理学功能，特别是不被人和动物肠 道吸收并能促进双歧杆菌的增殖，有益于肠道健康的一类寡糖，即双歧因子。如甘露寡 糖、果寡糖、水苏糖、半乳甘露寡糖、异麦芽糖寡糖等。多糖是指由超过 10 个以上的 单糖通过糖链组合而成的高级聚合物[2]，分子量为几千至几万不等。寡糖和多糖还能进 一步分为直链、支链和环状糖以及 α、β 异头物等[3]。 早在 100 年前德国著名科学家 Fischer 就开始对糖进行研究[4]。一个多世纪过去了， 糖研究尽管有了较大进展，但与蛋白质、核酸研究的飞跃式发展相比仍显得很落后。之 所以如此，有两方面的原因：一是糖类的结构比蛋白质和核酸要复杂得多，不仅结构复 杂、分子量大，又有多种异构体，对它们的研究受分析技术的限制难以深入；二是早年 所发现糖类的功能比较单调，仅认为糖类是提供能量的物质。 近年来随着研究的深入，发现糖类物质除了能提供能量外还有其它多方面独特的生 物活性[5-8]，诸如抗癌、抗菌、抗病毒、控制细胞分裂，以及调节细胞生长和人体免疫 功能等 。中药的各种调节作用也多与中药多糖和寡糖密切相关，如香菇多糖[9]的免疫调 节作用、抗感染作用、抗肿瘤作用，海藻多糖[10]、当归多糖[11]、刺五加多糖[12]、甘草 多糖[13]、芦荟多糖[14]、川牛膝多糖[15]等的免疫调节作用和抗肿瘤作用等，糖类物质的 研究受到人们越来越多的重视，尤其是其免疫调节作用已成为近年来的研究热点。到目 前为止已发现 200 余种植物多糖具有免疫活性，其中香菇多糖等质量稳定、疗效确切， 已用于临床。植物多糖对免疫系统的调节作用，主要表现为免疫增强或免疫刺激。它能 够激活巨噬细胞、自然杀伤细胞等，促进 B 细胞和 T 细胞的增殖，促进抗体生成和细 胞因子的分泌；运用多糖具有的免疫原性，还可用来构建新的疫苗。近年来随着对中药 多糖的深入研究，为临床开辟新的药源，寻找新型免疫调节剂及抗肿瘤药物提供了广阔 的前景。此外，多糖还可作为控释缓释制剂的药用辅料。 功能性寡糖的研究也较多，它们具有低热值、安全无毒、稳定、吸湿性强、黏度大 和不被胃肠道消化等特性，此外还具有降低血清胆固醇和中性脂肪含量、改善肠道微生 物区系、改善血糖含量、提高动物免疫机能和提高饲料利用效率的功效。李鹏等[16]研究 了半乳甘露寡糖对兔小肠黏膜结构的影响，陈小兵等[17]综述了甘露寡糖的免疫机制、益 生作用与应用技术，郭丽民等[18]综述了寡糖的药理作用和机制研究进展，王淑静等[19] 综述了寡糖抗肿瘤作用的研究进展。 1.1.1 糖类的检测模式 糖类的检测常用的模式有紫外（UV）、电化学（EC）、激光诱导荧光（LIF）、示差 折光（RID）和蒸发光散射（ELSD）等。但由于糖一般缺乏生色基团和荧光基团，除少 数糖在短波长段有吸收可以直接进行紫外检测外，大部分糖在进行紫外或荧光检测前都 需要进行衍生。包含双键、三键、共轭π键、孤对电子以及C=0、S=S、N=0、N=N等功 能团的物质都能吸收紫外光，常用的紫外衍生试剂有1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮、对氨基 苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酰肼；一些糖类可与2,6-ANS等荧光分子形成包合物并发射更 强荧光，进而可以实现糖类的荧光检测，常用的荧光衍生试剂有氨基吖啶酮和苯甲脒， 而既能紫外检测又能荧光检测的常用试剂有氨基吡啶、氨基苯甲酸、氨基苯甲酸酰胺、 芴甲氧基羰基氯和芴甲氧基羰基肼等。UV是绝大多数商品仪器的主要检测手段[20]，但 其缺点是灵敏度低，检测限在pmol范围。EC检测常用的方法有两种，包括安培法