新高及爱宕梨雄性不育特性及其败育细胞学研究.docVIP

新高及爱宕梨雄性不育特性及其败育细胞学研究 　　摘　要：为研究梨雄性不育表现和细胞学特征，观察分析了新高、爱宕和丰水(对照)梨花器官特征、花粉数量和育性，比较了花药和小孢子发育过程的细胞学特征。结果表明，新高、爱宕花药较小，花药内花粉粒数量很少、且活力低，表现出雄性不育的空囊花药。新高小孢子败育主要发生在单核晚期，但在小孢子母细胞减数分裂期就表现出部分异常；爱宕小孢子败育也主要发生在单核晚期，而此前发育正常。认为新高、爱宕小孢子败育可能与绒毡层提前解体有关。 　　关键词：梨；小孢子；雄性不育；细胞学 　　中图分类号：S661．2　文献标识码：A　文章编号：1009-9980(2007)04-433-05 　　 　　新高(Niitaka)(天之川×今村秋)和爱宕(Atago)(二十世纪×今村秋1梨为日本梨品种，上个世纪由日本引入中国，2者具有雄性不育特性。梨是典型的配子体型自交不亲和性果树，生产中必须配置授粉品种或人工辅助授粉，才能获得应有产量和品质。因此，了解梨品种的花粉数量、育性具有重要意义。目前新高和爱宕花粉败育的时期和机制尚未见报道。我们以薪高、爱宕为试材，以可育品种丰水(Housui)为对照，探讨新高、爱宕花粉败育的过程和途径，为分析和利用不育材料提供试验依据。 　　 　　1　材料和方法 　　 　　样品采自南京农业大学江浦园艺站梨资源圃内，供试品种新高、爱宕和丰水梨。自2005年2月下旬花芽萌动前开始取样至4月初开花期为止。定期采集花芽，1周2次，剥除鳞片后，用FAA固定液固定，常温保存。石蜡切片，厚度6～8 μm，铁矾－苏木精染色，固绿复染，中性树胶封固，光学显微镜观察并拍照。 　　 　　初花期(2005年4月－8日)采集新高梨、爱宕梨及对照丰水梨即将开放的大花蕾或初开花各100朵观察花器官特征，并用游标卡尺测量花器官长度，随机测量20朵花，取平均值；剥出花药，一部分用于花粉量测定，一部分散粉后用于花粉萌发率的测定，具体方法参照张绍铃等的方法。数据结果应用SPSS数据分析软件分析差异显著性。 　　 　　2　结果与分析 　　 　　2．1　新高、爱宕梨雄性不育性的表现 　　将新高、爱宕及对照丰水梨大花蕾进行花器比较观察(表1)，除花药外，新高、爱宕梨花器官形态正常，爱宕花朵较小，花器官也最小，新高花朵较大，花器官(包括花丝长)也最大。爱宕花药小，颜色浅，用手指轻捻无可见花粉。新高花药较大，但比丰水花药小，尤其花药横径较短，不饱满，轻捻亦无可见花粉。丰水花药最大，饱满，用手指轻捻有大量花粉。 　　不同品种的成熟花药的花粉粒数差异很大，新高和爱宕梨单花药的花粉量分别为462粒和183粒，分别为对照丰水梨(6689粒)的6.9％和2.7％，表明新高、爱宕梨花药花粉量很少，远低于丰水梨；每朵花的花药数也因品种不同而异：主要因为单花药花粉量不同，新高、爱宕花朵花粉量与丰水梨有极大差异，分别只有丰水梨的7.2％和2.3％，这表明新高、爱宕花朵花粉量很少(表2)。 　　雄性不育品种新高、爱宕梨的花粉萌发率也极低，分别只有4.4％和2.4％，而且萌发的花粉管长度很短，只有雄性可育品种丰水梨(花粉萌发率84.8％)的3.2％(表2)。表明新高、爱宕梨不仅花粉数量稀少，而且仅有的花粉发育不良，无生活力或生活力很低。 　　 　　2．2　丰水花药和小孢子发育过程 　　梨树越冬前，雄蕊原基已经形成并开始分化。早春气温回升，花药继续分化。在2月下旬至3月上旬，即花前1个月，花药壁分化完全，从外向内依次为药室内壁、中层(2层)、绒毡层，呈同心圆排列，圆心处为小孢子母细胞(图版-1)。绒毡层细胞较大、多核，细胞质均匀紧密，染色较深(图版-1)。花前20 d，小孢子母细胞即花粉母细胞分离，减数分裂开始(图版-2)。此时绒毡层细胞具退化迹象，细胞形状开始不规则，排列也开始疏松；中层细胞贮藏物质减少，细胞变为扁平状，以后逐步解体被吸收(图版-2)。随后小孢子母细胞完成减数分裂形成大小均匀的四分体(图版-3)。花前15 d，四分体解体，单核小孢子游离出来。刚游离的小孢子较小，形状不规则，核较大、细胞质较浓；药室内壁正在发育，绒毡层内含物减少，中层已变成一薄层(图版-4)。小孢子逐渐发育，体积增大、变圆。花前10 d，小孢子继续发育，体积迅速增大，细胞核从中央移至细胞的一侧，小孢子壁已发育的非常明显(图版-5)。花前5～7 d，单核晚期的小孢子的细胞核进行有丝分裂，生成2个子核，形成大小不等的2个细胞：生殖细胞和营养细胞。双核花粉粒积累营养物质，染色较深，此时，绒毡层显著解体，核消失，内含物消失殆尽(图版-6)。4月初，梨树初花。丰水梨花粉粒发育成熟，绒毡层和中层消失，仅余部分残迹；两相邻药室相通，裂腔开裂，准备散粉(