肿瘤型M2丙酮酸激酶检测在结直肠癌中临床价值.docVIP

肿瘤型M2丙酮酸激酶检测在结直肠癌中临床价值 　　【摘要】 近年来，结直肠癌的发病率及死亡率呈明显上升趋势，早期诊断CRC对于治疗有重大意义。肿瘤型丙酮酸激酶（TU M2-PK）可能因肿瘤坏死或细胞转化而被释放入体液，通常以无活性的二聚体形式占据主要地位，故在体液中可被检测。应用酶联免疫吸附试剂（ELISA）检测结直肠癌患者68例，正常对照者82例，进行相关分析，评价血清TU M2-PK水平与结直肠癌分期，淋巴结转移、性别、年龄的相关性和对结直肠癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值。同时用化学发光法（LC）检测血清中CEA表达水平，两者进行比较分析。通过ROC曲线分析其作为结直肠癌诊断指标的临床价值。本文实验提示血清TU M2-PK检测对早期诊断结直肠癌、判断临床分期、浸润转移，评价预后有重要意义。其灵敏度及阳性预测值明显高于CEA，对结直肠癌有一定的重要意义，两者联合检测可显著提高CRC的诊断率，可以作为一项新型的结直肠癌肿瘤标志物应用。 　　【关键词】 TU M2-PK； 结直肠癌； ELISA； CEA 　　中图分类号 R735.3 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2015）27-0051-04 　　doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2015.27.024 　　结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤。目前发病率位于我国恶性肿瘤的第四位，全球发病率仅次于肺癌、乳腺癌，居恶性肿瘤发病率的第三位[1]。其发病率和死亡率都呈逐年上升趋势。丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）是糖酵解途径的一个关键酶，多以二聚体和或四聚体形式存在于不同的组织中，根据肿瘤代谢活动的需要，两者可进行相互之间的转化[2]。肿瘤型M2-PK可能因肿瘤坏死或细胞转化而被释放入体液，通常以无活性的二聚体形式占据主要地位，故在体液中可被检测[3]。肿瘤型M2-丙酮酸激酶（TU M2-PK）可用于肾癌、胃肠道肿瘤、乳腺癌等的筛查、诊断及跟踪治疗，其价值得到临床的充分肯定[4-5]。近几年的大量科学家研究发现，肿瘤M2型丙酮酸激酶（tumor M2 pyruvate kinase，TU M2-PK）在消化道肿瘤患者的外周血中呈明显高表达，并且与肿瘤的发生、发展密切相关[6]。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　1.1.1 样本来源 病例组为收集内蒙古自治区人民医院肿瘤内科患者2014年1-12月结直肠癌住院患者血清68例；男38例，女30例；年龄≥60岁39例，年龄60岁患者29例；Ⅰ期5例，Ⅱ期9例，Ⅲ期21例，Ⅳ期33例；有淋巴结转移患者41例，无淋巴结转移患者27例，所有患者均经影像学、肠镜及病理确诊，有无淋巴结转移以手术所见及临床病理学结果为主要依据。同时对照组为收集健康体检患者血清82例，男47例，女35例，均为排除结直肠癌的正常健康人。病例组及对照组所有个体均知情同意。将病例组与对照组年龄、性别做比较，得出两组年龄齐同（t=0.631，P=0.529）、性别构成一致（字2=0.031，P=0.860），差异均无统计学意义，详见表1。 　　1.1.2 主要试剂及生产厂家 （1）TU M2-PK诊断试剂盒，北京强智生物技术有限公司（中国）；（2）癌胚抗原定量检测试剂盒（化学发光法），罗氏生物技术公司（瑞士）。 　　1.1.3 主要实验仪器 罗氏电化学发光免疫分析仪（E601，瑞士）；雷勃酶标仪（MK3，芬兰）；酶标板快速孵育器（MKF-6，中国）。 　　1.2 方法 　　1.2.1 血液采集 上述入选患者均在清晨7点抽取静脉血3 ml，乙二氨四乙酸（EDTA）抗凝、混匀会，在4 ℃下用离心机以3000 r/min离心5 min，收集上清液分装后置于-80 ℃冰箱保存待测。 　　1.2.2 检测TU M2-PK方法 TU M2-PK采用酶联免疫法（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）。 　　1.2.3 检测CEA方法 CEA检测采用化学发光免疫检测（chemiluminescence immunoassay）。应用罗氏电化学发光免疫分析仪自动分析样本。 　　1.3 统计学处理 　　统计学分析采用SPSS 13.0统计软件包整理录入资料；多组资料平均水平差异性比较采用方差分析，两两比较时采用SNK法；多组资料率的比较采用R*C字2检验，两两比较时依据公式α1=2α/（k（k-1）+2）（k为构成比个数）调整检验水准；检验显著性水平α为0.05。TU M2-PK参考值为0～15 U/ml，大于15 U/ml判断为阳性。 　　2 结果 　　2.1 患者的血清中TU M2-PK浓度与OD值相关回归分析 　　以标准品浓度为横坐标，对应OD值为